Что такое рекомбинантный эпидермальный

Обновлено: 02.05.2024

Фармакологическая группа вещества Фактор роста эпидермальный

Нозологическая классификация

Характеристика

Фактор роста эпидермальный человеческий рекомбинантный (ЭФРчр) — высокоочищенный пептид, состоящий из 53 аминокислот, имеет молекулярную массу 6054 Да и изоэлектрическую точку 4,6. ЭФРчр продуцируется штаммом дрожжей Saccharomyces cerevisiae, в геном которого методами генной инженерии введен ген ЭФРчр.

Фармакологическое действие

Фармакология

ЭФРчр, полученный на основе технологии рекомбинантной ДНК , по механизму действия идентичен эндогенному фактору роста эпидермальному, вырабатываемому в организме. ЭФРчр стимулирует пролиферацию фибробластов, кератиноцитов, эндотелиальных и других клеток, участвующих в ранозаживлении, способствуя эпителизации, рубцеванию и восстановлению эластичности тканей.

Фармакокинетика

ЭФРчр в плазме не обнаруживается, но определяется в тромбоцитах (приблизительно 500 ммоль/1012 тромбоцитов).

У большинства пациентов Т_mах после инъекции в пораженный участок составил от 5 до 15 мин. Среднее значение AUC после первого введения препарата в дозе 75 мкг и через 27 дней после введения составляет 198 и 243 пг·ч/мл соответственно, а средняя С_mах — 1040 пг/мл. T_l/2 и среднее время удержания ЭФРчр в организме были близки к 1 ч. Полный клиренс происходит примерно за 2 ч.

Применение вещества Фактор роста эпидермальный

В составе комплексной терапии синдрома диабетической стопы с глубокими незаживающими в течение 4 нед и более нейропатическими или нейроишемическими ранами площадью более 1 см 2 , достигающими сухожилия, связки, сустава или кости.

Противопоказания

Гиперчувствительность; диабетическая кома или диабетический кетоацидоз; ХСН III–IV класса по NYHA; наличие в течение последних 3 мес эпизодов острой сердечно-сосудистой патологии (тяжелое острое сердечно-сосудистое состояние), таких как острый инфаркт миокарда, тяжелая стенокардия, острый инсульт или транзиторная ишемическая атака, тромбоэмболии (тромбоз глубоких вен, тромбоэмболии легочной артерии); тяжелая AV-блокада (III степени), фибрилляция предсердий с неконтролируемым ритмом; злокачественные новообразования; беременность, период грудного вскармливания; детский возраст до 18 лет; почечная недостаточность (скорость клубочковой фильтрации 0,6, но 0,5, и/или транскутанное напряжение кислорода в тканях

Ограничения к применению

ЭФРчр следует с осторожностью применять у пациентов с поражением клапанов сердца (например кальцификация аортальных клапанов), тяжелым стенозом сонных артерий (

Применение при беременности и кормлении грудью

Применение ЭФРчр во время беременности противопоказано (в связи с отсутствием данных о безопасности применения).

При назначении ЭФРчр в период грудного вскармливания, грудное вскармливание следует прекратить.

Побочные действия вещества Фактор роста эпидермальный

Частота побочных эффектов (с учетом количества всех пациентов, получавших лечение ЭФРчр в клинических исследованиях, в т.ч. и в РФ) была следующей: у 1,2% пациентов отмечалась головная боль, у 24,3% — тремор, у 24% — боль в месте введения, у 17,8% — чувство жжения в месте инъекции, у 11,3% — озноб, у 2,8% — повышение температуры тела, у 4,4% — инфекция в месте введения.

Боль или жжение в месте введения препарата наблюдались с похожей частотой у пациентов, которым вводили препарат ЭФРчр и плацебо. Эти нежелательные явления, скорее всего, связаны с самой процедурой инъекции.

Примерно у 10–30% пациентов во всех исследованиях наблюдали озноб и дрожь. Эти явления часто наблюдались вскоре после инъекции и были преходящими. Они никогда не были тяжелыми и не приводили к прерыванию лечения. В большинстве случаев их связь с лечением считалась определенной или вероятной.

Взаимодействие

В течение курса лечения ЭФРчр не рекомендуется местное применение других ЛС.

Передозировка

Сведения о передозировке ЭФРчр отсутствуют.

Способ применения и дозы

Инъекционно, только в условиях специализированного лечебно-профилактического учреждения, путем обкалывания предварительно очищенной раны. Обкалывание проводят 3 раза в неделю до образования грануляционной ткани, покрывающей всю поверхность раны, или до 8 нед (максимальная продолжительность лечения).

Меры предосторожности

ЭФРчр применяется в составе комплексной терапии (антибактериальная терапия, хирургическая обработка раны) синдрома диабетической стопы.

Перед введением ЭФРчр проводят хирургическую обработку раны с соблюдением всех условий асептики и антисептики.

До начала лечения ЭФРчр необходимо исключить злокачественную этиологию язвы.

Содержимое одной упаковки лекарственной формы ЭФРчр используют только для одного пациента. Следует проявлять осторожность, чтобы избежать возникновения повреждений и бактериального загрязнения флаконов.

Настоятельно рекомендуется использовать новую стерильную иглу для каждой инъекции, чтобы избежать любого потенциального проникновения возбудителей инфекций в очаг поражения.

Неиспользованный своевременно ЭФРчр или его остатки должны быть соответствующим образом утилизированы.

Необходима смена иглы для каждой инъекции.

Влияние на способность к управлению транспортным средством и работу с механизмами. Данных об отрицательном влиянии ЭФРчр на способность к управлению транспортным средством или работе с механизмами нет.

Московский государственный медико-стоматологический университет

Кафедра патологической физиологии, кафедра госпитальной терапевтической стоматологии, пародонтологии и гериартрической стоматологии Московского государственного медико-стоматологического университета

Кафедра госпитальной терапевтической стоматологии, пародонтологии и гериатрической стоматологии Московского государственного медико-стоматологического университета

Заживление хирургической раны слизистой оболочки полости рта под влиянием применения рекомбинантного эпидермального фактора роста в эксперименте

Журнал: Российская стоматология. 2011;4(1): 32‑37

Воложин А.И., Гемонов В.В., Кабалоева Д.В., Суражев Б.Ю. Заживление хирургической раны слизистой оболочки полости рта под влиянием применения рекомбинантного эпидермального фактора роста в эксперименте. Российская стоматология. 2011;4(1):32‑37.
Volozhin AI, Gemonov VV, Kabaloeva DV, Surazhev BIu. Healing of surgical wound in oral mucosa after the treatment with recombinant epidermal growth factor in experiment. Russian Stomatology. 2011;4(1):32‑37. (In Russ.).

Московский государственный медико-стоматологический университет

Экспериментальное исследование позволило установить благоприятное влияние применения рекомбинантного эпидермального фактора роста на регенерацию при лечении ран слизистой оболочки полости рта у здоровых крыс. Анализ полученных данных показал, что преимущественное усиление репаративной регенерации было достигнуто при повышении концентрации препарата в питьевой воде до 500 мкг/мл.

Московский государственный медико-стоматологический университет

Факторы роста при лечении ран

Травма слизистой оболочки полости рта является распространенной причиной обращения за стоматологической помощью. Ее возникновение обусловлено различными причинами: хирургическими вмешательствами, ожогами и повреждениями при местном применении лекарственных препаратов; нарушением целостности слизистой оболочки в период адаптации к съемным протезам; механическим воздействием на десну и слизистую оболочку во время препарирования зубов, краем искусственной коронки и др. Негативные особенности заживления подобных ран обусловлены наличием в полости рта разнообразной микробной флоры, постоянной механической и термической нагрузкой на ткани этой локализации и высокой специфичностью их гистологического строения [9]. Несмотря на различную этиологию поражений, общим принципом лечения таких пациентов в стоматологической клинике является применение средств, направленных на регенеративные процессы в тканях [3]. Учитывая, что регенерация тканей представляет собой четко регулируемый каскадный и многокомпонентный морфофункциональный процесс, обеспечиваемый сложными кооперативными межклеточными взаимодействиями, представляет интерес поиск препаратов, применение которых обеспечило бы наилучший результат регенерации слизистой оболочки полости рта [4, 7]. Получение рекомбинантного эпидермального фактора роста (РЭФР) и его экспериментальное испытание на моделях регенерации эпидермиса явилось мощным толчком к развитию этого направления. РЭФР не обладает видовой специфичностью, т.е. функционирует у животных различных видов. Эпидермальный фактор роста (ЭФР) специфически связывается с рецепторами на поверхности клеточных мембран, стимулируя тем самым пролиферацию, таксис и дифференциацию клеток, что способствует быстрому и качественному заживлению ран [5, 10]. Этот фактор управляет ростом клеток эпителия, эндотелия и фибробластов, регулирует их хемотаксис [2]. При повреждениях в полости раны количество рецепторов к ЭФР возрастает [6]. Это вызывает перемещение клеток из здоровых неповрежденных тканей в пораженные участки [1, 8]. Эффективность отечественного РЭФР для оптимизации заживления ран слизистой оболочки полости рта еще не была изучена в эксперименте. Сейчас РЭФР проходит экспериментальную проверку, по итогам которой может быть рекомендован в качестве специфического стимулятора заживления ран на слизистой оболочке полости рта.

Целью настоящей работы явилось экспериментальное обоснование применения РЭФР для оптимизации заживления повреждений слизистой оболочки полости рта.

Материал и методы

ЭФР относится к группе факторов роста (цитокины) и является полипептидом, состоящим из 53 аминокислот, его молекулярная масса 6021 Д. Фактор устойчив к действию кислот и высоких температур. Относится к наиболее стабильным из всех изученных белков. ЭФР играет значительную роль в регуляции обменных и восстановительных процессов, присутствуя в клетках всех тканей организма и регулируя рост клеток. Стимулирует таксис противовоспалительных клеток, что способствует быстрому и качественному заживлению ран.

Эксперимент выполнен на 36 белых крысах линии Вистар, массой 220-280 г. Под наркозом (Zoletil 50, «Vibrac», Франция) животным наносили круглые раны диаметром 5 мм на твердом небе до кости. Кровотечение останавливали гемостатической губкой. Животных были разделены на 3 группы по 12 крыс в каждой. В 1-й группе животные постоянно получали чистую питьевую воду; во 2-й группе животным давали воду с РЭФР в концентрации 100 мкг/мл; в 3-й группе животные получали воду с РЭФР в концентрации 500 мкг/мл. Растворы для питья готовили ежедневно, хранили при температуре –40°С. Воду с РЭФР животные 2-й и 3-й групп получали с 9 до 18 ч, в остальное время крысы пили обычную водопроводную воду, потребляли одинаковое количество жидкости, получали сбалансированный брикетированный корм. Из эксперимента животных выводили на 3, 7, 14 и 21-е сутки.

Выделяли верхнюю челюсть, фиксировали в 10% нейтральном формалине, декальцинировали в трилоне Б, заливали в целлоидин. Микропрепараты окрашивали гематоксилином и эозином, PAS-реакцией, азокармином, импрегнировали серебром. Динамику заживления ран оценивали планиметрически и патоморфологически, гистохимическую оценку репаративного процесса проводили по содержанию гликозаминогликанов, гликогена и нуклеиновых кислот.

РЭФР предоставлен ГНИИ особо чистых биопрепаратов (Санкт-Петербург). В России РЭФР синтезирован из E. сoli.

Результаты и обсуждение

В 1-й группе на 3-й день наблюдений диаметр раны у всех животных не отличался от первоначального в момент ее нанесения. Края раны ровные, на поверхности тонкий, мягкий струп из сохранивших жизнедеятельность лейкоцитов, склеенных плазмой. Центральная часть раны ограничена пластом многослойного эпителия. Дно дефекта образовано костной тканью твердого неба, покрытой утолщенной надкостницей (рис. 1). Рисунок 1. Раневой дефект на 3-и сутки (1-я группа). Костная ткань на дне дефекта. Утолщенная надкостница. Окраска гематоксилином и эозином. ×200. В самой кости и в надкостнице воспалительный процесс. Наряду с ним на границе дефекта с тканью отмечено начало репаративных процессов. На 7-е сутки область раны окружена пластом эпителия, внедряющимся под струп (рис. 2). Рисунок 2. Слизистая оболочка твердого неба на участке раны к 7-м суткам эксперимента (1-я группа). Наползающий пласт эпителия. Окраска гематоксилином и эозином. ×200. Диаметр дефекта уменьшается за счет наползания пласта эпителия под струп. Под струпом на поверхности кости располагается утолщенная надкостница с клетками фибробластического ряда. В клетках регенерирующего эпителия гранулы гликогена, заполняющие цитоплазму новообразованных клеток (рис. 3). Рисунок 3. Слизистая оболочка твердого неба на участке раны к 7-м суткам эксперимента (1-я группа). Гликоген в наползающем пласте эпителия. Окраска: PAS-реакция. ×200. По краю дефекта происходит образование грануляционной ткани, ее основная масса представлена фибробластами различной степени зрелости, макрофагами, отдельными сегментоядерными лейкоцитами и тонкими пучками коллагеновых волокон. Фибробласты заполняли саму зону дефекта, формируя поверх костной ткани грануляционную ткань, содержащую кровеносные капилляры, по которой шло напластование эпителия. На 14-е сутки сохранялся тонкий струп. Пласт эпителия продолжал свое движение к центру дефекта. В эпителии появлялись клетки с признаками паракератоза, что свидетельствует о дифференциации клеток. Гликогенсодержащие клетки располагались непосредственно на мигрирующем крае эпителиального пласта. По мере дифференциации эпителиоцитов глыбки гликогена в них исчезали. Наползание пласта эпителия шло по грануляционной ткани, в этот период отмечалось увеличение коллагеновых волокон, происходило восстановление соединительнотканной основы (рис. 4). Рисунок 4. Слизистая оболочка твердого неба на участке раны к 14-м суткам эксперимента (1-я группа). Новообразованные пучки коллагеновых волокон (синего цвета) в зоне дефекта. Окраска азокармином. ×200. Незакрытым пластом эпителия оставался лишь центральный участок дефекта. На 21-е сутки зона дефекта во всех наблюдениях была перекрыта утолщенным эпителием с менее выраженным роговым слоем. Нижняя поверхность его имела ровную границу. Под эпителием волокнистая соединительная ткань, богатая фибробластами различной степени зрелости. Обнаруживаются кровеносные сосуды, заполненные форменными элементами. В двух случаях центр дефекта оставался незакрытым эпителием, что связано с воспалительным процессом. При этом на поверхности дефекта находился струп, и эпителизация шла под его поверхностью.

Во 2-й группе (РЭФР 100 мкг/мл) на 3-и сутки дефект покрыт эластичным струпом. Отмечается образование грануляционной ткани. По краям раны утолщенный пласт регенерирующего эпителия без ороговения, а в его клетках выявлялся гликоген (рис. 5). Рисунок 5. Слизистая оболочка твердого неба на участке раны к 3-м суткам эксперимента (2-я группа). Начало эпителизации. Наползание эпителия под струпом. В пласте эпителия содержится гликоген. Окраска: PAS-реакция. ×200. Под струпом скопление фибробластов, макрофагов, лейкоцитов. Средняя часть дефекта заполнена рыхло расположенными лейкоцитами и макрофагами, а также фибробластами различной степени зрелости. Костная ткань покрыта утолщенной надкостницей, в составе которой обнаруживались остеобласты. В некоторых случаях отмечалось образование костной ткани. На 7-е сутки эксперимента по краю раны прогрессирующая эпителизация. Эпителиальный пласт утолщен, внедряется под струп, имеет ровную нижнюю поверхность. Толщина струпа неравномерна и варьировала в широких пределах. Эпителиальные сосочки отсутствовали.

В новообразованном эпителии гликоген в виде мелких глыбок (рис. 6). Рисунок 6. Слизистая оболочка твердого неба на участке раны к 7-м суткам эксперимента (2-я группа). Пласт новообразованного эпителия внедряется под расположенный на поверхности дефекта струп. В эпителии располагается гликоген. Окраска: PAS-реакция. ×200. Под эпителием типичная грануляционная ткань с наличием капилляров и клеток: фибробластов, отдельных макрофагов, а ближе к центру дефекта располагались лейкоциты. Репаративные процессы шли от периферии к центру дефекта. Это относилось к образованию грануляционной ткани и процессу эпителизации дефекта. Сам процесс эпителизации происходил быстрее по сравнению с аналогичным сроком у животных 1-й группы. Это ускорение репаративных процессов относилось и к дифференциации новообразованного пласта эпителия. На 14-е сутки значительная часть дефекта была покрыта утолщенным пластом новообразованного эпителия. У одной из крыс отмечено полное перекрытие дефекта эпителием, характеризующимся выраженным роговым слоем (рис. 7). Рисунок 7. Слизистая оболочка твердого неба на участке раны к 14-м суткам эксперимента (2-я группа). Большая часть дефекта закрыта эпителием с явлением ороговения. Окраска гематоксилином и эозином. ×200. Его поверхностную часть образовывали клетки с явлениями ороговения, и лишь клетки самой передней части эпителиального клина не имели признаков ороговения. В них обнаруживались скопления гликогена, которые сливались в однородную массу. Под эпителием располагалась грануляционная ткань с коллагеновыми и аргирофильными волокнами (рис. 8). Рисунок 8. Слизистая оболочка твердого неба на участке раны к 14-м суткам эксперимента (2-я группа). Коллагеновые и аргирофильные волокна в расположенной под эпителием ткани. Окраска: импрегнация серебром. ×400. У остальных крыс большая часть дефекта покрыта новообразованным пластом эпителия. На 21-е сутки дефекты у всех крыс были эпителизированы. По краям раны структура эпителия была полностью восстановлена, сам пласт немного утолщен (рис. 9). Рисунок 9. Слизистая оболочка твердого неба на участке раны к 21-м суткам эксперимента (2-я группа). Область дефекта закрыта утолщенным пластом эпителия с наличием в клетках шиповатого слоя следов гликогена. Окраска: PAS-реакция. ×400. Струпа на поверхности раны нет. Дифференциация эпителия шла от центра дефекта к его периферии. По периферии отмечалось полное восстановление структуры эпителиального пласта. Имело место восстановление рогового слоя и соединительнотканной основы, состоявшей из пучков коллагеновых волокон. Нижняя поверхность эпителиального пласта имела на большом протяжении сосочки, их появление шло от периферии дефекта к его центру.

В 3-й группе (РЭФР 500 мкг/мл) уже на 3-и сутки было отмечено наползание эпителия с краев дефекта, на поверхности которого располагался тонкий струп (рис. 10). Рисунок 10. Слизистая оболочка твердого неба на участке раны к 3-м суткам эксперимента (3-я группа). Наползание толстого пласта новообразованного эпителия. Эпителий внедряется под струп. Окраска гематоксилином и эозином. ×400. Толщина и рост наползающего под струп новообразованного эпителия более интенсивны, чем в 1-й группе. Утолщение идет в основном за счет клеток шиповатого слоя. Под пластом новообразованного эпителия образовывалась грануляционная ткань, богатая фибробластами различной степени зрелости и макрофагами. Новообразованный эпителий имел толстый роговой слой, нижняя поверхность эпителия была неровная за счет образованных здесь эпителиальных сосочков. На 7-е сутки эпителизация дефекта в сравнении с 1-й группой была более интенсивной. Эпителий покрывал большую часть дефекта, имел довольно толстый роговой слой. Активно образовывалась волокнистая соединительная ткань. Струп большей частью отсутствовал, и в этих участках поверхность дефекта была перекрыта тонкой эластичной пленкой, состоящей из плазмы крови и отдельных лейкоцитов. Под пластом эпителия располагалась новообразованная соединительная ткань с пучками рыхло расположенных коллагеновых волокон, а также разнообразных клеточных элементов. Вся площадь дефекта заполнена волокнистой соединительной тканью, которая ниже новообразованного пласта эпителия срасталась с надкостницей. Кость имела строение, типичное для пластинчатой кости, на ее поверхности располагались остеобласты. В некоторых участках отмечались узуры, заполненные соединительной тканью. На 14-е сутки у всех крыс дефект перекрыт эпителием с выраженным роговым слоем (рис. 11). Рисунок 11. Слизистая оболочка твердого неба на участке раны к 14-м суткам эксперимента (3-я группа). Новообразованный пласт эпителия, перекрывающий зону травмы. На поверхности пласта четко виден роговой слой. Окраска гематоксилином и эозином. ×200. На его поверхности располагались уплощенные роговые чешуйки, которые местами слущивались. Лишь в отдельных случаях в самом центре дефекта имелся утолщенный пласт эпителия. Скорость пролиферации эпителия заметно увеличивалась. Подлежащая соединительная ткань построена из волокнистых структур, изменяющих свое расположение. Часть из них располагалась параллельно пласту эпителия. Нижняя поверхность эпителия образовывала выросты или сосочки. Подлежащая костная ткань имела обычную структуру, характерную для пластинчатой кости. На 21-е сутки выявлена полная регенерация эпителия, восстановлена и структура эпителиального пласта. На всем протяжении на поверхности эпителия имело место восстановление рогового слоя (рис. 12). Рисунок 12. Слизистая оболочка твердого неба на участке раны к 21-м суткам эксперимента (3-я группа). Новообразованный утолщенный пласт эпителия с выраженным роговым слоем. Коллагеновые волокна в подлежащей соединительной ткани. Окраска азокармином. ×400. Роговые чешуйки плотно прилежат друг к другу. Сам роговой слой отличался от остальных слоев по окраске. Гликоген в новообразованном эпителии нигде не выявлялся. Нижняя поверхность эпителиального пласта имеет волнообразный вид за счет образовавшихся здесь эпителиальных сосочков. Соединительная ткань собственной пластинки слизистой оболочки содержала волокнистые структуры и клеточные элементы, главным образом фибробласты.

Таким образом, исследование установило благоприятное влияние применения РЭФР при заживлении ран слизистой оболочки полости рта. Анализ полученных данных показал, что наиболее оптимальной концентрацией препарата является 500 мкг/мл. Именно в этом случае происходит выраженное ускорение процесса эпителизации дефекта. В целом процесс репаративной регенерации осуществляется на базе одного и того же комплекса стереотипных реакций без проявления каких-либо новых их вариантов. Говоря о влиянии РЭФР, можно лишь отметить ускорение восстановительных процессов в слизистой оболочке неба у экспериментальных животных.

В целом результаты проведенного исследования показывают хорошую репаративную способность отечественного РЭФР, что может быть использовано в дальнейшем для его клинических испытаний.

В 2014 г. число больных сахарным диабетом в мире достигло 387 млн человек, и сохраняется тенденция к дальнейшему росту и, кроме того, «омоложению» заболевания. Больные сахарным диабетом подвержены высокой опасности инвалидизации вследствие быстрого образования и длительного заживления раневых дефектов кожных покровов и мягких тканей, ведущих к ампутации нижней конечности. Очевидно, что с увеличением темпов распространения сахарного диабета и его осложнений будет расти и удельный вес больных с дефектами кожных покровов и мягких тканей нижних конечностей [1, 2, 4].

Лечение трофических нарушений является значительной проблемой в хирургии диабетической стопы. При синдроме диабетической стопы нарушается взаимоотношение белковых фракций (дезорганизация коллагена), имеющее существенное значение в течении репаративно-пролиферативной фазы раневого процесса. Таким образом, нарушается физиологическое течение раневого процесса, происходит хронизация язвенного дефекта, и, как результат, наступает раневая кахексия. У больных снижается количество продуцируемого фибробластами коллагена, что ведет к замедлению заживления раны, повышается уровень матриксных металлопротеаз, замедляются процессы формирования экстрацеллюлярного матрикса, ремоделирования и формирования новых тканей [2, 5]. Стандартные методы лечения больных с трофическими поражениями тканей при синдроме диабетической стопы не всегда позволяют достичь заживления раневого дефекта и предупредить ампутацию. Большой интерес вызывают методы регенеративной медицины, включая генные, клеточные [3] и матриксные ацеллюлярные технологии. В ряде исследований показана способность факторов роста стимулировать заживление нейропатических язв у больных с синдромом диабетической стопы при условии многократного введения и создания высоких локальных концентраций (это условие необходимо, так как пептидные факторы роста быстро разрушаются протеолитическими ферментами) [3].

Цель работы — провести сравнительную оценку эффективности практического применения препарата эберпрот-п и биопластического материала коллост у больных с синдромом диабетической стопы, направленного на оптимизацию и повышение качества лечения раневых дефектов кожи и мягких тканей; внедрение в клиническую практику и изучение эффективности новых научных разработок, повышение продуктивности хирургического пособия при данной патологии.

Материал и методы

Препарат эберпрот-п относится к фармакологической группе регенерантов и репарантов, действующее вещество которого представляет собой фактор роста эпидермальный человеческий рекомбинантный (Recombinant Human Epidermal Growth Factor) — ЭФРчр. ЭФРчр продуцируется штаммом дрожжей Saccharomycesсerevisiae, в геном которого методами генной инженерии встроен ген ЭФРчр. Фактор роста эпидермальный человеческий рекомбинантный, полученный на основе технологии рекомбинантной ДНК, по механизму действия идентичен эндогенному фактору роста эпидермальному, вырабатываемому в организме [1]. Производитель: Центр генной инженерии и биотехнологии (ЦГИБ), Республика Куба.

Эпидермальный фактор роста (ЭФР) ускоряет рост и деление эпителиальных клеток, в человеческом организме содержится в тромбоцитах, фагоцитах, моче, слюне, молоке и в плазме крови. ЭФР — один из членов семейства белков, отвечающих за деление клеток эпителиального покрова. Все члены этого семейства содержат одну или несколько характерных аминокислотных последовательностей, согласно формуле: CX 7 CX 4—5 CX 10—13 CXCX 8 GXRC, где X — любая аминокислота.

Биопластический материал коллост представляет собой нереконструированный коллаген I типа с полностью сохраненной нативной структурой. Коллост изготавливают из кожи крупного рогатого скота. В процессе обработки удаляется эпидерма, подкожный жировой слой и все дермальные клетки без разрушения коллагеновой матрицы, создается неиммуногенный, инертный и стойкий материал, волокна которого напоминают решетку. Он действует как шаблон для формирования новой ткани. Фибробласты, кровеносные и лимфатические сосуды, нервные волокна, внедряясь из окружающей ткани в коллагеновую решетку, распространяются по ней. Постепенно рассасываясь, коллост формирует новый аутодермальный слой [4] (ООО «Биофармахолдинг», Россия).

Основываясь на вышеизложенных свойствах, мы провели сравнительное исследование, направленное на изучение воздействия препарата эберпрот-п и биопластического материала коллост на течение раневых процессов у больных с верифицированным диагнозом «синдром диабетической стопы». Больные были разделены на две группы. В 1-ю группу вошли пациенты, которым в составе комплексной терапии вводили препарат эберпрот-п (n=16). 2-ю группу составили пациенты, которым при идентичных условиях имплантировали биоматериал коллост (n=28). Состав и характеристика 1-й и 2-й групп даны в табл. 1.

Таблица 1. Характеристика исследуемых больных по группам

Составляющие лечения больных в обеих группах были идентичны, за исключением указанных элементов местного лечения. В состав лечения входили: общая терапия, ангиохирургическая коррекция сосудистого русла (1-я группа: БПШ — 3 пациента, РЭД — 1 пациент; 2-я группа: БПШ — 4 пациента, РЭД — 1 пациент), местное лечение (aggressive surgical treatment).

Методика местного лечения включала в себя три этапа:

1) дебридмент раневого дефекта;

2 имплантацию препарата эберпрот-п (1-я группа) или биоматериала коллост (2-я группа);

3) создание благоприятных условий для дальнейшего течения раневого процесса.

На первом этапе у всех больных обеих групп применяли:

а) ультразвуковую гидрохирургическую обработку дефектов с подачей в систему слабого раствора анестетика (раствор новокаина 0,25% от 200 до 300 в зависимости от степени выраженности местных деструктивно-воспалительных процессов и площади раневой поверхности);

б) механическую некрэктомию с обработкой дна, стенок и краев дефекта; вскрытием и удалением гнойно-некротических карманов и затеков.

Второй этап у пациентов 1-й группы включал введение в раневой дефект препарата эберпрот-п. Для приготовления лекарственного раствора во флакон, содержащий 75 мкг лиофилизата, добавляли 5 мл воды для инъекций, после чего осторожно перемешивали в течение нескольких секунд до получения однородного прозрачного и бесцветного раствора без видимых твердых частиц. Полученный раствор сразу после приготовления вводили в область дна, стенок, краев раны, а также в область паравульнарных тканей. Количество введенного препарата соотносили с площадью дефекта мягких тканей исходя из нормы 0,5 мл препарата на 1 см 2 площади дефекта. При каждой новой инъекции использовалась новая стерильная игла. Глубина введения составляла около 0,5 см. Введение препарата производили каждые 48 ч в течение 3 нед. Число флаконов на одного пациента варьировалось от 8 до 48.

У пациентов 2-й группы на данном этапе производили имплантацию биоматериала коллост в виде 7% геля в дозе 1,5 мл (одна из официальных форм). Перед применением гель, находящийся в одноразовом стерильном шприце в контурной ячеистой упаковке, нагревали до 32—36 °С. Введение геля осуществляли в область дна, стенок, краев дефекта на глубину от 0,2 до 0,5 см под углом 15—25° на выходе иглы шприца для создания «туннеля». На одну манипуляцию требовалось, в зависимости от площади раневого дефекта, от 1 до 3 шприцев. Кратность процедуры —1 введение.

Третьим этапом больным 1-й группы после манипуляции поверхность раны закрывали влажной повязкой с физиологическим раствором и фиксировали сверху нетравматичной нейтральной повязкой, смену повязок производили ежедневно.

У пациентов 2-й группы после имплантации биоматериала на раневую поверхность накладывали самофиксирующиеся гидроколлоидные повязки, которые меняли каждые 48 ч. Через 12—15 сут после процедуры переходили на нетравматичные нейтральные повязки или их сочетание с повязками, содержащими ионы Ag.

Всем пациентам обеих групп на третьем этапе производилась разгрузка стоп с наложением иммобилизирующих повязок по технологии ТСС.

Результаты

Наблюдение за пациентами обеих групп осуществлялось с момента начала лечения в течение 12 мес. Наблюдению подлежали следующие факторы:

1) скорость и продуктивность репаративных процессов в ране и сроки эпителизации раневого дефекта;

2) относительная скорость заживления раны [5];

3) общее самочувствие пациентов и переносимость проводимой терапии;

4) частота рецидивов на фоне адекватной перманентной терапии;

5) количество осложнений, в том числе ампутаций, после имплантации препарата и биоматериала.

Результаты наблюдения представлены в табл. 2.

Таблица 2. Результаты лечения в исследуемых группах больных после введения препарата эберпрот-п и биоматериала коллост

Достигнутая положительная динамика раневого процесса у пациентов 1-й группы (применение препарата эберпрот-п) отмечена в следующие сроки: у 1 пациента — через 6 мес, у 1 — через 5 мес, у 1 — через 1 мес с момента начала лечения.

Отдаленные результаты в нескольких случаях остались неизвестны по причине отказа со стороны пациентов от дальнейшего лечения препаратом вследствие «плохой переносимости»: у 2 пациентов после 4-го и 5-го сеанса введения (головные боли, тахикардия, тошнота, снижение артериального давления, чувство жара, боль и жжение высокой интенсивности в области введения препарата); у 1 пациента после 6-го сеанса введения (жалобы: «становится очень плохо сразу же после процедуры, теряю сознание»). Во всех этих случаях проводилась медикаментозная коррекция. Ампутация на уровне пальцев стоп выполнена: 1 пациенту — через 5 нед, 1 пациенту — через 4 нед после 3-недельного цикла введения препарата из-за развития остеомиелита на фоне незакрывающегося дефекта и полного разрушения костных структур. Метатарзальная ампутация (1 пациенту) выполнена через 2 нед из-за развития гангрены. Ампутация на уровне голени выполнена: 1 пациенту — через 2 нед, 1 пациенту — через 6 нед из-за развития гангрены с субтотальным поражением стопы. Некрэктомия с аутодермопластикой выполнена у 2 пациентов (через 3 нед и 16 нед соответственно из-за отрицательной динамики и увеличения площади дефекта).

Начало эпителизации раневого дефекта у пациентов 2-й группы (имплантация биоматериала коллост) наступало через 10,3±2,8 сут. Гипертрофического рубцевания ран, рецидивов трофических нарушений кожи в течение заболевания, а также отказов от лечения из-за плохой переносимости процедуры во 2-й группе не отмечено.

Клинические примеры

1. Больная М., 1958 г. р. (рис 1, 2).

Рис. 1. Вид стопы. Диагноз: синдром диабетической стопы, нейроишемическая форма, W3. Трофическая язва левой стопы, ХАН 3. Состояние после рентгенэндоваскулярной вазодилатации слева. Диабетическая полинейропатия, сенсомоторная, умеренно выраженная.

За время лечения не наблюдалось значимого уменьшения размера язвы.

Отдаленные результаты: развитие гангрены 4 пальца левой стопы, с разрушением 4 плюснефалангового сустава, на фоне незаживающей язвы через 8 нед после окончания лечения; выполнена ампутация 4 пальца левой стопы, с резекцией головки 4 плюсневой кости.

2. Больной М., 42 года (рис 3—5).

Рис. 3. Вид стопы. Диагноз: синдром диабетической стопы, нейроишемическая форма, W2. Трофические язвы правой стопы, ХАН 3. Состояние после бедренно-подколенного шунтирования справа, ампутации 3 пальца правой стопы с резекцией дистальной головки 3 плюсневой кости. Диабетическая полинейропатия, сенсомоторная, умеренно выраженная. Диабетическая нефропатия. Диабетическая ретинопатия.

Рис. 4. Имплантация материала коллост (коллаген I типа) в виде геля 7%.

Рис. 5. Вид стопы на 27-е сутки после комплексного лечения с имплантацией материала коллост в виде геля 7%.

Отдаленные результаты: полная эпителизация дефекта.

Выводы

Применение биопластических материалов на основе нативного коллагена I типа отечественного производства в лечении дефектов тканей у больных с синдромом диабетической стопы на данном этапе предпочтительнее фактора роста эпидермального человеческого рекомбинантного соответствующего производителя. При применении ЭФРчр количество ампутаций пальцев стоп и метатарзальных ампутаций составило 19%, ампутаций на уровне голени — 12,5%. При применении биоматериала коллост на основе коллагена I типа во 2-й группе ампутаций за период наблюдения не отмечено. Эпителизация дефектов в отдаленные сроки при использовании ЭФРчр составила 19%, при применении биоматериала коллост — 89%. Индивидуальная непереносимость препарата на основе ЭФРчр составила 19%, что вызвало отказ от лечения со стороны данных пациентов. Напротив, при использовании биопластического материала коллост индивидуальной непереносимости в группе не отмечено.

Вы здесь: Главная Информация Информация для специалистов Статьи Эпидермальный фактор роста Рекомбинантный человеческий Эпидермальный Фактор Роста (Epidermal Growth Factor) - заживление повреждений кожи

Рекомбинантный человеческий Эпидермальный Фактор Роста (Epidermal Growth Factor) - заживление повреждений кожи

Для многих врачей заживление повреждений кожи является одной из самых актуальных и труднорешаемых проблем.

Для хирурга, особенного пластического, – блестяще выполненная операция может пойти насмарку, если послеоперационная рана долго не заживает, возникают осложнения, инфицирование, или вместо тонкого следа образуется грубый и безобразный келоидный рубец.

Врачи ожоговых центров и травматологи как никто другой знают сложности восстановления кожных покровов после ожогов и открытых переломов. А глубокие диабетические язвы и пролежни вообще трудно поддаются лечению.

Врачи дерматологи и косметологи ежедневно решают эстетические проблемы своих пациентов и здесь очень важно быстро восстановить кожу и избежать образования рубцов. После различных шлифовок, в том числе лазерных, дермабразии, пилингов и банального удаления невусов и бородавок кожа должна быть гладкой и красивой, именно этого ждут пациенты от врача.

Что было раньше?

Эпидермальный Фактор Роста ускоряет пролиферацию тканей, влияет на таксис клеток, препятствует образованию рубцов, ускоряет эпителизацию, способствует быстрому заживлению. Такой подход к лечению повреждений является активным.

ИСТОРИЯ ОТКРЫТИЯ

В 1962 году Стэнли Коэн и Рита Леви-Монтальчини обнаружили новый термостабильный белок в тканях подчелюстных слюнных желез мышей, который обладал способностью лечить конъюнктивит и воспаления дёсен у этих животных. Тесты in vitro на кожных и эпителиальных тканях подтвердили тот факт, что данное вещество стимулирует рост клеток. Белок получил название «эпидермальный фактор роста», сокращённо EGF. С тех пор исследования непрерывно продолжались, а в 1986 году проф. Коэн и Леви-Монтальчини получили Нобелевскую премию в области биологии и медицины за выдающиеся достижения в исследовании свойств эпидермального фактора роста.

ЧТО ТАКОЕ EGF?

Эпидермальный Фактор Роста (EGF) – относится к группе факторов роста (цитокины) и является полипептидом. Он состоит из 53 аминокислот, имеет вес 6021 Да, он устойчив к действию кислот и высоких температур. Относится к наиболее стабильным из всех изученных белков. Присутствует в клетках всех тканей организма, регулирует рост клеток.

EGF играет важную роль в регуляции обменных и восстановительных процессов. Специфически связывается с рецепторами на поверхности клеточных мембран, стимулирует таксис противовоспалительных клеток и дифференциацию восстанавливающихся, что способствует быстрому и качественному заживлению ран.

В нормальных условиях содержание факторов роста в организме человека относительно невелико и стабильно. Но при каких-либо повреждениях, например, ранениях, в полости раны возрастает количество рецепторов, чувствительных к эпидермальному фактору роста, благодаря этому повышается концентрация EGF. Но в условиях ухудшающейся экологии, при неполноценном питании, анемии, инфекции и дисфункции различных органов процессы регуляции нарушаются, не вырабатывается достаточное количество EGF, поэтому заживление повреждений происходит гораздо дольше и значительно менее эффективно.

Использование Эпидермального Фактора Роста позволяет удовлетворить потребность тканей в этом веществе, доказательством этого является отсутствие свободных рецепторов в ране после её обработки раствором EGF.

Клинические испытания доказали, что Эпидермальный Фактор Роста улучшает рост клеток эпителия, эндотелия и фибробластов, улучшает пролиферацию тканей и хемотаксис клеток; уменьшает вероятность поражения инфекцией, рост рубцовых тканей, сокращает время заживления, период нетрудоспособности; восстанавливает нормальное функционирование тканей после повреждения.

В России клинические испытания проведены на базе НИИ Медицины Труда.

GeneTime TM

GeneTime – это препарат на основе Эпидермального Фактора Роста.

Выпускается в виде спрея, что намного удобнее чем мазь. Стерильный спрей бесконтактно распыляется на поврежденную поверхность кожи, ожог, послеоперационную рану или поверхность кожи после косметологической процедуры (шлифовка, пилинг, дермабразия и др.). Частота применения – один раз в день или чаще.

Отличительная особенность данного препарата – высокая дозировка действующего вещества. 1 мл содержит 2000 IU (международных единиц) EGF, что соответствует 2 мг.

Расход препарата – 1 нажатие на 5 см 2 .

Сам препарат не является антисептиком и не содержит каких либо других антисептических компонентов. Но как было сказано выше, его применение ускоряет заживление любых ран и повреждений, что уменьшает вероятность инфицирования. Если рана инфицирована – показана обработка антисептиками.

Сертификация

В настоящее время в России препарат GeneTime сертифицирован как «Средство косметическое профилактическое для регенерации кожного покрова».

Противоопухолевые препараты другие. Противоопухолевые препараты прочие.

Фармакологические свойства

Фармакокинетика

Фармакокинетические исследования не требуются для вакцин.

Фармакодинамика

Симавакс-EGF® увеличивает общую выживаемость пациентов с не мелкоклеточным раком легкого на поздней стадии по сравнению с не вакцинированными. Ответ на лечение (обусловленный увеличением выживаемости) коррелирует с иммунным ответом. Вакцинирование Симавакс-EGF® индуцирует специфические антитела против Эпидермальный фактор роста (EGF), которые приводят к депривации или иммунологической «кастрации» белка EGF. Эпидермальный фактор роста (EGF) представляет собой полипептидную молекулу из 53 аминокислот с молекулярной массой 6045 кДа, которая была впервые выделена из подчелюстной железы мыши. EGF представляет собой пептид, способный стимулировать пролиферацию эпителиальных и мезенхимальных клеток in vitro и in vivo через мембранный рецептор. В последние годы EGF-рецептор (EGF-R) стал мишенью, широко изученной в терапии рака. EGF-R представляет собой мембранный гликопротеин 170 кДа, внутриклеточный домен которого связан со специфической тирозинкиназной активностью. Активация EGF-R его лигандами нарушает регуляцию клеточного цикла за счет увеличения пролиферации, апоптозной блокады, стимуляции ангиогенеза, повышенной подвижности, адгезии и инвазивности неопластических клеток. Лиганды EGF-R включают EGF, трансформирующий человеческий фактор роста α (TGF-), EPIGEN, эпирегулин, бета-целлюлин и гепарин-связывающий фактор роста как эпидермальный фактор роста (HB-EGF). Экспрессия EGF-R увеличивается в одной трети всех опухолей эпителиального происхождения, включая опухоли легких, предстательной железы, груди, толстой кишки, головы и шеи, яичника, шейки матки, пищевода, желудка, поджелудочной железы, почек и астроцитомы. Большинство опухолей не мелкоклеточного рака легкого (NSCLC) чрезмерно экспрессируют рецептор EGF. Чрезмерная экспрессия EGF-R связана с плохим прогнозом. В исследовании 121 пациента с NSCLC в 83% случаев чрезмерная экспрессия EGF-R была значимым отрицательным прогностическим фактором. Система EGF / EGF-R является наиболее подходящим агентом в лечении эпителиальных опухолей.

Во многих клинических исследованиях изучали применение ингибиторов EGF-R при лечении NSCLC . Вакцина Симавакс-EGF® содержит рекомбинантный человеческий EGF, полученный из дрожжевых клеток Saccharomyses cerevisiae, конъюгированный с белком-носителем P64k Neisseria meningitidis рекомбинантной природы и продуцируемый из клеток Escherichia coli и с Montanide ISA 51 VG в качестве адъюванта. Результаты пробных испытаний и клинических исследований II- III фазы с Симавакс-EGF® у взрослых пациентов на поздних стадиях NSCLC продемонстрировали эффективность этого нового препарата.

Показания к применению

Симавакс - EGF ® показан для поддерживающей терапии пациентам с немелкоклеточным раком легкого на поздних стадиях (IIIb / IV).

Способ применения и дозы

0, 8 мл конъюгата добавляют во флакон, содержащий адъювант (Montanide ISA 51), а затем смешивают до получения эмульсии. Из полученной эмульсии шприцом для инъекций извлекают 1,2 мл и вводят пациенту в места инъекций ( две дельтовидные и две ягодичные мышцы).

фаза индукции, доза применяется каждые 14 дней (4 инъекции по 1,2 мл);

фаза консолидации, доза применяется каждые 28 дней (4 инъекции по 1,2 мл).

Побочные действия

Нежелательные реакции классифицированы по частоте развития и системе органов. Категории частоты определяются в соответствии со следующими условными обозначениями: очень часто (≥ 1/10), часто (≥ 1/100 до

покраснение, анорексия, судороги, озноб, тремор, головная боль, тошнота, рвота, лихорадка, одышка, приливы, гипертония или гипотония.

местные побочные реакции: такие как эритема и боль в месте введения инъекции.

мигрень, озноб, тремор, одышка, боль в груди, потливость, озноб и недомогание.

Противопоказания

беременность и период кормления

наличие аллергии к химическим или биологическим соединениям состава, аналогичного вакцинам

неконтролируемые интеркуррентными заболеваниями, включая активные инфекции, симптоматический застой сердечной недостаточности, нестабильная стенокардия и сердечная аритмия

гиперчувствительность к циклофосфамиду

детский и подростковый возраст до 18 лет.

Лекарственные взаимодействия

Взаимодействие с другими лекарственными средствами не обнаружены.

Особые указания

Вакцинация Симавакс - EGF ® должна начинаться только под наблюдением врача, специализирующегося на лечении онкологических пациентов на уровне первичного, вторичного и третичного внимания.

Правильность приготовление эмульсии необходимо проверить до введения Симавакс - EGF ®. Эмульсия должна быть однородной, светло-желтого цвета, без пузырьков, без жидкости ее отличающей.

Существует химическая несовместимость между Montanide VG и резиновыми соединениями шприцев, поэтому рекомендуется использовать шприцы без резиновых покрытий на поршене для создания эмульсии антигена (конъюгат rhEGF-rP64K) с адъювантом (Montanide ISA 51VG) и после вводится Симавакс – ЭФР.

Особенности влияния лекарственного средства на способность управлять транспортным средством или потенциально опасными механизмами

Симавакс - EGF ® не влияет на способность управлять автотранспортом и работу с различным оборудованием.

Передозировка

Нет известных эффектов передозировки Симавакс - EGF ®

Форма выпуска и упаковка

По 0,8 мл препарата в стеклянном флаконе. По 4 стеклянных флакона с препаратом в пачке из картона. По 0,8 мл растворителя в стеклянном флаконе. По 4 стеклянных флакона с растворителем в пачке из картона. По 1 пачке с препаратом и по 1 пачке с растворителем в комплекте с 4 стерильными пластиковыми шприцами по 2 мл и 8 стерильными иглами размером 21 Gx 11\2 вместе с инструкцией по медицинскому применению на государственном и русском языках помещают в пачку из картона.

Условия хранения

При температуре от 2°С до 8 °С, в защищенном от света месте. Не замораживать. Хранить в недоступном для детей месте.

Срок хранения

Не применять по истечении срока годности.

Условия отпуска из аптек

Производитель/упаковщик

Центр молекулярной иммунологии ( CIM ), Республика Куба

Calle 216 esquina 15, Reparto Atabey, Playa, La Habana, Республика Куба

Держатель регистрационного удостоверения

Центр молекулярной иммунологии ( CIM ), Республика Куба

Calle 216 esquina 15, Reparto Atabey, Playa, La Habana, Республика Куба

Наименование, адрес и контактные данные организации на территории Республики Казахстан, принимающей претензии (предложения) по качеству лекарственных средств от потребителей и ответственной за пострегистрационное наблюдение за безопасностью лекарственного средства :

Читайте также: