Конфокальная лазерная сканирующая микроскопия кожи это
Обновлено: 18.04.2024
Оценка здоровой кожи с помощью прижизненной конфокальной сканирующей лазерной микроскопии
Овчинникова А.Ю., Лукашева Н.Н. , Ткаченко С.Б.
НИИ молекулярной медицины ММА им. И.М.Сеченова, лаборатория по изучению репаративных процессов в коже, Москва
ФППОВ ММА им. И.М.Сеченова, кафедра кожных и венерических болезней, Москва
Современные неинвазивные методы исследования позволяют быстро получать результаты анализа кожи и повторно многократно обследовать определенный участок кожи в отличие от традиционной гистологии. Такие методы намного более безопасны как для врача, так и для пациента, проводятся без повреждения кожных покровов и не причиняют дискомфорта или болевых ощущений. Среди неинвазивных методов наибольшим разрешением обладает прижизненная конфокальная лазерная сканирующая микроскопия, которая позволяет получить изображения не только придатков кожи, но и послойно отличить клетки эпидермиса и дермы, оценить состояние сосудов кожи. Такой метод обследования дает возможность не только объективно определить размер, форму клеток, толщину слоев кожи, но и морфологические клеточные признаки. Прижизненная конфокальная сканирующая лазерная микроскопия позволяет делать тончайшие послойные оптические срезы в плоскости, параллельной поверхности кожи. Именно такой метод может стать основным методом диагностики и контроля лечения в дерматологии.
В лаборатории по изучению репаративных процессов в коже НИЦ ММА им. И.М.Сеченова были изучены различные параметры кожного покрова в зависимости от возраста и фототипа пациентов: толщина рогового слоя, минимальная толщина эпидермиса, количество дермальных сосочков на единицу площади в поле обзора, глубина залегания капилляров с видимым кровоток в сосочковом слое дермы, средний диаметр просвета сосудов и глубина расположения сетчатой системы коллагеновых волокон. В России работ по исследованию кожи in vivo с помощью метода конфокальной лазерной сканирующей микроскопии не проводилось. Более того, в зарубежной литературе не было найдено общей базы данных топографии нормальной кожи с цифровыми показателями, полученными с помощью этого метода, ведь для оценки любой патологии очень важно знать параметры «нормы».
В исследовании приняли участие 20 здоровых добровольцев (5 мужчин и 15 женщин), из них 10 человек со вторым фототипом по Фицпатрику и 10 с третьим. Возраст пациентов варьировался от 18 до 38 лет, средний возраст 27±2. У каждого участника исследования выяснялась инсоляция за последние полгода. Исследование проводилось после получения письменного информированного согласия от каждого пациента. У каждого пациента были изучены три разных области кожного покрова в зависимости от степени воздействия инсоляции: лоб, грудь и внутренняя сторона предплечья. В работе использовался один из последних конфокальных лазерных микроскопов Vivascope 1500 (Lucid Inc, США). Проводилась как визуальная оценка конфокальных срезов, так и количественная. Измерения каждого параметра повторялось не менее пяти раз на одном участке исследования, после чего выводились средние арифметические показателей.
C помощью прижизненной конфокальной сканирующей лазерной микроскопии показаны топографические особенности в строении здоровой кожи у людей различных возрастов с разными фототипами кожи. На участках кожи, подверженных постоянному солнечному излучению, поверхность рогового слоя была ярче, с более выраженным дермоглифом. У людей с третьим фототипом чаще отмечаются яркие скопления гранул над базальной мембраной - меланиновые «шляпки», расположенные над ядрами кератиноцитов. При сравнении структуры сосочкового слоя выявлено, что в областях кожного покрова с частой инсоляцией среднее количество сосочков на единицу площади выше, их диаметр сильно варьируется, а средний диаметр просвета сосудов намного меньше, чем на участках кожи, защищенных от прямых лучей солнца. Также различаются конфокальные снимки коллагеновых волокон на различных участках кожного покрова: в области лба и груди коллагеновые волокна более скопленные и располагаются пучкообразно, тогда как в области предплечья волокна чаще образовывают равномерную сеть.
Среди возрастных изменений строения кожи отмечено, что толщина рогового слоя с годами увеличивается, особенно на участках кожного покрова с частой инсоляцией. Изменяется и структура сосочкового слоя дермы: с возрастом сосочки дермы вытягиваются, уплощаются по высоте, сосочковый слой дермы истончается.
Таким образом, в настоящей работе были оценены возрастные изменения слоев кожи, а также различия строения кожи в зависимости от инсоляции и фототипа методом прижизненной конфокальной сканирующей лазерной микроскопии.
Первый МГМУ им. И.М. Сеченова
ГБУЗ «Московский научно-практический центр дерматовенерологии и косметологии» Департамента здравоохранения Москвы, Москва, Россия
Научно-клинический и образовательный центр пластической хирургии Университетской клинической больницы №1 Первого МГМУ им. И.М. Сеченова, Москва, Россия
Российская медицинская академия последипломного образования, Москва
Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова
Прижизненная конфокальная сканирующая лазерная микроскопия в диагностике меланомы кожи
Журнал: Клиническая дерматология и венерология. 2011;9(5): 38‑45
Ахматова А.М., Потекаев Н.Н., Решетов И.В., Ткаченко С.Б., Лукашева Н.Н. Прижизненная конфокальная сканирующая лазерная микроскопия в диагностике меланомы кожи. Клиническая дерматология и венерология. 2011;9(5):38‑45.
Akhmatova AM, Potekaev NN, Reshetov IV, Tkachenko SB, Lukasheva NN. The role of life-time confocal scanning laser microscopy in diagnostics of skin melanoma. Klinicheskaya Dermatologiya i Venerologiya. 2011;9(5):38‑45. (In Russ.).
Первый МГМУ им. И.М. Сеченова
Первый МГМУ им. И.М. Сеченова
ГБУЗ «Московский научно-практический центр дерматовенерологии и косметологии» Департамента здравоохранения Москвы, Москва, Россия
Научно-клинический и образовательный центр пластической хирургии Университетской клинической больницы №1 Первого МГМУ им. И.М. Сеченова, Москва, Россия
Российская медицинская академия последипломного образования, Москва
Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова
Меланома кожи — злокачественная опухоль, возникающая в результате неопластической трансформации меланобластов, меланоцитов и невусных клеток. Она относится к числу наиболее злокачественных и сложных по своему клинико-гистологическому течению, серьезных в плане прогноза опухолей. В редких случаях меланома кожи может спонтанно регрессировать, в остальных — активно метастазировать или длительно оставаться местным процессом.
В структуре злокачественных заболеваний в разных странах мира, в том числе и России, на нее приходится 1—10%. Еще до 60-х годов прошлого века меланома кожи встречалась относительно редко и существенного прироста не составляла, однако с 70-х годов ее прирост удваивается каждые 10—15 лет [1].
В связи с этим онкологи всего мира исследуют и изучают новые методы, которые могли бы помочь совершенствовать диагностику меланомы. Одной из тенденций современной медицины является применение неинвазивных органосохраняющих методов исследования. Благодаря научным разработкам и внедрению в практику инновационных технологий в последнее десятилетие появились новые неинвазивные высокоразрешающие методы исследования структуры кожи и других тканей. К ним относятся оптическая когерентная томография, высокочастотное ультразвуковое сканирование, ядерно-магнитный резонанс, конфокальная лазерная сканирующая микроскопия (КЛСМ).
Последний метод занимает особое место среди визуализирующих технологий, так как позволяет получить изображение эпидермиса и поверхностной части дермы с разрешением, приближенным к традиционной световой микроскопии [2]. Записав в памяти компьютера серию оптических срезов в горизонтальной и вертикальной плоскостях, можно провести объемную реконструкцию объекта и получить его трехмерное изображение, осуществить морфологический анализ микроанатомических структур кожных поражений, близкий к гистологическому. В настоящее время наибольшую диагностическую ценность в дерматологии данный метод представляет для дифференциальной диагностики пигментных новообразований [3]. По данным ряда исследователей [4], чувствительность КЛСМ составляет 88,15%, специфичность — 97,6%. Большое количество меланина, представленного в меланоцитарных очагах, делает пигментные новообразования кожи (невусы, меланома) идеальными для изображения и диагностики методом прижизненной КЛСМ [5, 6]. Целью любого визуализирующего метода, применяемого в дерматологии, является диагностика меланомы на ранних стадиях заболевания, так как от этого зависит эффективность проводимого лечения. Результаты многих зарубежных исследований свидетельствуют о том, что меланома может быть достаточно успешно диагностирована с помощью КЛСМ. Так, нарушение архитектоники шиповатого слоя за счет нечетких границ клеток и ярких серых частиц (вероятно, меланина), распространенных внутри эпидермиса (рис. 1), Рисунок 1. Нарушение архитектоники шиповатого слоя за счет нечетких границ клеток и ярких серых частиц (вероятно, меланина), распространенных внутри эпидермиса. наличие плеоморфных ярких клеток внутри эпидермиса и дермы, которые могут быть разной формы, обладать крупными ветвящимися отростками и эксцентрично расположенными крупными ядрами позволяют диагностировать меланому [7, 8]. Следует отметить, что педжетоидная инфильтрация в поверхностных слоях эпидермиса более характерна для поверхностно-распространяющейся меланомы и менее — для лентиго-меланомы.
Внутриэпидермальная меланома также может быть диагностирована с помощью данного метода на основании критериев, которые применяются в традиционной гистологии. Так, отсутствует характерный вид булыжной мостовой, который формируют кератиноциты. Сами клетки имеют неодинаковый размер и преломляющую способность (рис. 2). Рисунок 2. Отсутствует испещеренность или структура булыжника, формирующаяся кератиноцитами. Последние имеют неодинаковый размер и преломляющую способность (желтые стрелки) или отсутствуют. Визуализируются атипичные круглые яркие клетки (красные стрелки). Конфокальные изображения внутриэпидермальных меланом позволили выявить увеличенное число интрадермальных увеличенных (атипичных) меланоцитов в солитарных единицах во всех слоях эпидермиса, включая верхние зернистый и шиповатый слои [9]. Меланоцитарная инфильтрация (педжетоидная), может быть слабая (рис. 3): Рисунок 3. Меланоцитарная инфильтрация эпидермиса. Несколько клеток Педжета округлой формы маленького размера. Клеточная плотность классифицирована как «низкая». несколько клеток типа Педжета [*] округлой формы маленького размера. Клеточная плотность классифицирована, как «низкая» (на одном изображении 1—3 клетки), так и «высокая» (на одном изображении более 6 клеток). Часто определяется комбинация разновидностей педжетоидных клеток по форме (круглые и древовидные — отростчатые, звездчатой формы — плеоморфизм) и размерам (маленькие, средние и большие; рис. 4). Рисунок 4. Комбинация разновидностей педжетоидных клеток по форме — круглые (желтые стрелки), древовидные (отростчатые; красные стрелки), звездчатой формы (плеоморфизм; голубые стрелки) и размеру — маленькие, средние и большие (а—в).
К следующим важным критериям диагностики, на которые необходимо обратить внимание, следует отнести изменения в дермо-эпидермальном соединении: в норме оправа из ярких клеток формирует резко разграниченное кольцо вокруг темного кожного волосяного сосочка — «обрамленный сосочек» (рис. 5, а). Рисунок 5. Дермо-эпидермальные соединения. а — дермо-эпидермальное соединение: оправа ярких клеток (желтые стрелки) формирует резко разграниченное яркое кольцо вокруг темного кожного волосяного сосочка — «обрамленный сосочек»; б — дермальные сосочки лишены четкого ободка ярких клеток, но отделены рядом клеток с высокой преломляющей способностью — «необрамленные сосочки» (при меланоме); в — высокая плотность атипичных ярких клеток в дермо-эпидермальном соединении; г — тут же листоподобные клетки; д — листоподобные клетки; е — клетки педжетоидные; Рисунок 5. ж — дермо-эпидермальные утолщения: расширение межсосочкового пространства, сформированного слиянием клеток. При меланоме (иногда встречается при диспластическом невусе и невусе Шпица) дермальные сосочки лишены четкого ободка ярких клеток, но отделены рядом клеток с высокой преломляющей способностью — «необрамленные сосочки» (рис 5, б).
Визуализируется высокая плотность атипичных ярких клеток (рис. 5, в), листоподобных (рис. 5, г, д). Большое количество клеток педжетоидного типа более характерно для лентиго-меланомы (рис. 5, е) и реже встречается при поверхностно-распространяющейся форме меланомы. Кроме того, могут наблюдаться так называемые дермо-эпидермальные утолщения — расширения межсосочкового пространства, сформированного слиянием клеток (рис. 5, ж).
Между сосочковым слоем дермы и базальным слоем эпидермиса могут определяться кластеры меланоцитарных клеток [10]:
1) овальные компактные клеточные скопления (могут встречаться в обычном невусе; рис. 6, а); Рисунок 6. Кластеры меланоцитарных клеток в виде овальных компактных клеточных скоплений (а) и редких групп клеток (б), церибриформные кластеры (слившаяся совокупность маленьких клеток с темными щелями, подобными булыжной мостовой; в).
2) редкие группы клеток (могут встречаться в невусе Шпица; рис. 6, б);
3) церибриформные кластеры — слившаяся совокупность маленьких клеток с темными щелями, подобными булыжной мостовой (визуализируются исключительно при меланоме; рис. 6, в).
В сосочковом и сетчатом слоях дермы при меланоме отсутствует нормальная архитектоника. Определяются ядросодержащие атипичные клетки: круглые, овоидные или отростчатые, обладающие высокой преломляющей способностью (рис. 7, 8). Рисунок 7. В сосочковом и сетчатом слоях дермы при меланоме отсутствует нормальная архитектоника. Определяются ядросодержащие атипичные клетки: круглые (желтая стрелка), овоидные (красная стрелка), отросчатые (голубая стрелка), обладающие высокой преломляющей способностью. Рисунок 8. Атипичные отростчатые клетки.
Таким образом, можно заключить, что использование данного оптического метода диагностики позволяет не только детально изучить поверхность кожи, но и визуализировать внутрикожные изменения в очагах поражения, идентифицировать отдельные элементы очага поражения кожи, каждый из которых в свою очередь соответствует определенной морфологической картине [11]. Несомненно, что данный оптический метод в практике дерматологов и онкологов позволит повысить точность диагностики опухолей кожи и соответственно выбрать правильную тактику ведения пациента с обоснованным объемом иссечения в случае выбора хирургического метода лечения.
[*] Клетки типа Педжета — атипичные меланоциты с яркой цитоплазмой и темным ядром, похожие на клетки Педжета. Имеют различный размер и форму.
ФГБУ «Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии», Екатеринбург, Россия, 620076
Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии Минздравсоцразвития России, Екатеринбург
ФГБУ "Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии" Минздрава России
ГОУ ВПО Пермская государственная медицинская академия им. акад. Е.А. Вагнера
Опыт применения конфокальной лазерной сканирующей микроскопии кожи в диагностике первичной кожной диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы
Журнал: Клиническая дерматология и венерология. 2018;17(1): 72‑76
Представлен краткий обзор литературы о частоте встречаемости, классификации, клинических проявлениях, а также о современных методах диагностики и лечения первичных кожных диффузных крупноклеточных В-клеточных лимфом. Авторы приводят описание клинического случая предварительной диагностики заболевания с применением на предбиопсийном этапе конфокальной лазерной сканирующей микроскопии кожи и последующей верификацией диагноза патоморфологическим и иммуногистохимическим исследованиями биоптата кожи.
ФГБУ «Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии», Екатеринбург, Россия, 620076
Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии Минздравсоцразвития России, Екатеринбург
ФГБУ "Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии" Минздрава России
ГОУ ВПО Пермская государственная медицинская академия им. акад. Е.А. Вагнера
Первичные лимфомы кожи (ПЛК) представляют собой гетерогенную группу заболеваний, развитие которых обусловлено неопластической пролиферацией в коже клонов Т-лимфоцитов, NK-клеток или В-лимфоцитов, аффинных к кожной ткани. По данным литературы [1—3], заболеваемость первичными кожными лимфомами в мире варьирует от 0,3 до 1,18 случаев на 100 тыс. населения и продолжает увеличиваться. Первичные кожные В-клеточные лимфомы составляют от 10 до 30% всех ПЛК, характеризуются, как правило, относительно однотипным клиническим течением и благоприятным прогнозом.
Согласно классификации WHO-EORTC, В-клеточные лимфомы кожи подразделяют на пять типов:
— первичная кожная В-клеточная лимфома маргинальной зоны;
— первичная кожная лимфома из клеток фолликулярного центра;
— первичная кожная диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома, тип нижних конечностей;
— первичная кожная диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома, другая;
— интраваскулярная крупноклеточная В-клеточная лимфома [1, 2, 4, 5].
Первичная кожная диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома, тип нижних конечностей, составляет примерно 5—10% от всех кожных В-клеточных лимфом. Эта форма В-клеточных лимфом встречается преимущественно у пожилых женщин (медиана — 78 лет), проявляется быстро растущими узлами и бляшками, располагающимися на коже нижних конечностей. В дерме определяется инфильтрат из центробластов, иммунобластов и в меньшей степени центроцитов. Опухолевые клетки диффузно инфильтрируют дерму с замещением нормальных тканей и облитерацией придатков. Инфильтрат может проникать и в подкожную клетчатку. Эпидермис обычно интактен и отделен зоной неизмененного коллагена (Grenz zone). Реактивный инфильтрат и стромальная реакция выражены слабо. Опухолевые клетки экспрессируют CD20+, CD79a+, bcl2+, MUM-1/IRF4+ и FOX-P1+. Пятилетняя выживаемость больных составляет в среднем 55% [6—8].
Первичная кожная диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома другого типа по многим патоморфологическим характеристикам совпадает с первичной кожной диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомой; тип нижних конечностей клинически характеризуется солитарными узлами, расположенными на других участках кожного покрова, чаще в области головы и шеи. Опухолевый инфильтрат экспрессирует CD20+, CD79a+ [4, 7].
Диагностический процесс предусматривает комплексную оценку клинической картины, анализ результатов патоморфологического и иммуногистохимического исследований биоптата кожи, фиксирующих наличие злокачественной лимфоидной пролиферации в коже. Однако выполнение биопсии кожи у больного не всегда бывает осуществимым из-за ряда причин: по этическим — при отсутствии добровольного информированного согласия больного на проведение манипуляции, а также в связи с локализацией опухоли в косметически значимых и проблемных для пациента зонах.
В данной ситуации приобретает особое значение высокотехнологичный метод неинвазивного исследования in vivo патоморфологии кожи — конфокальная лазерная сканирующая микроскопия кожи (КЛСМ).
КЛСМ является уникальным диагностическим методом, позволяющим без нарушения целостности кожи проводить многократные исследования различных очагов у одного и того же больного с разрешением, приближенным к традиционной световой микроскопии.
Преимуществами данного метода являются:
— быстрота получения результатов по сравнению с классическим патоморфологическим исследованием;
— возможность послойного изучения эпидермиса и дермы, толщиной 5 мкм;
— анализ клеточного состава эпидермиса и верхних слоев дермы;
— изучение васкуляризации сосочковой дермы, в том числе диаметра капилляров;
— возможность оценки площади распространения и степени инвазии опухолевого инфильтрата.
В опубликованной зарубежной и отечественной литературе, касающейся применения метода КЛСМ в дерматологии, приводятся данные по описанию цитоархитектоники здоровой кожи, а также по изучению патоморфологических изменений при фотостарении кожи, при новообразованиях кожи (актинический кератоз, базально-клеточная карцинома, меланома), при воспалительных и инфекционных заболеваниях (псориаз, розацеа, онихомикоз, дерматофитии, аллергический контактный дерматит) [9—13].
Данные научных исследований патоморфологии эпидермиса и дермы у больных первичными кожными лимфомами методом КЛСМ в отечественной литературе отсутствуют, а в существующей мировой литературе [14—17] носят описательный характер и немногочисленны. Тем не менее в них отмечены его высокая диагностическая ценность и корреляция получаемых результатов с данными гистологического исследования биоптата кожи.
В клинике ГБУ СО «УрНИИДВиИ» проводятся научные исследования диагностических возможностей КЛСМ при первичных кожных лимфомах. В качестве примера использования метода КЛСМ в диагностике первичной кожной диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы приводим описание собственного наблюдения.
Больная З., 1949 года рождения, обратилась в клинику института с жалобами на опухолевидное образование на коже волосистой части головы, болезненное при пальпации.
Anamnesis morbi: считает себя больной в течение 2 лет, когда впервые обратила внимание на появление небольшого элемента на коже волосистой части головы, не сопровождающегося субъективными ощущениями. В течение 1-го месяца заболевания больная обратилась к дерматовенерологу по месту жительства, где был установлен диагноз локализованная склеродермия. По завершении курса наружной терапии (гидрокортизоновая мазь 2 раза в сутки в течение 14 дней) улучшения не наблюдалось. Со слов больной, образование постепенно увеличивалось в размере, появилась болезненность при пальпации. В связи с неэффективностью предшествующей терапии и ухудшением кожного процесса больная была направлена в ГБУ СО «УрНИИДВиИ» для уточнения диагноза.
Анамнез жизни, аллергоанамнез и профессиональный маршрут без особенностей. Наследственность по кожным заболеваниям и онкопатологии не отягощена.
Объективно: больная среднего роста, правильного телосложения, удовлетворительного питания. В легких дыхание везикулярное, хрипов нет. Тоны сердца ясные, ритмичные, артериальное давление 130/86 мм рт. ст., частота сердечных сокращений 70 ударов в минуту. Живот мягкий, безболезненный при пальпации, печень и селезенка не увеличены. Пальпируются подчелюстные и заушные лимфатические узлы овальной и округлой формы, эластической консистенции, безболезненные, подвижные, до 1 см в диаметре. Физиологические отправления в норме.
Status localis: непораженные участки кожных покровов физиологической окраски, нормальной влажности и тургора. Видимые слизистые влажные, физиологической окраски. Кожный процесс представлен опухолевидным образованием неправильной формы, плотной консистенции, розово-красного цвета, диаметром 4×4,5 см, локализован на коже волосистой части головы, в затылочной области справа. Очаг инфильтрирован, возвышается над поверхностью кожи на 0,5 см, имеет неровную и бугристую поверхность с частично сохраненными волосяными фолликулами и ростом волос (рис. 1). Рис. 1. Больная З. Опухолевидное образование на коже затылочной области волосистой части головы с частичным сохранением роста волос. Волосы и ногтевые пластинки не изменены. Дермографизм красный, быстрый.
Лабораторные данные: общий анализ крови: гемоглобин 131 г/л, эритроциты 4,21·10 12 /л, лейкоциты 5,5·10 9 /л, нейтрофилы 2,8·10 9 /л, эозинофилы 0,3·10 9 /л, лимфоциты 2,1·10 9 /л, моноциты 0,3·10 9 /л, СОЭ 5 мм/ч. В общем анализе мочи и иммунограмме отклонений не выявлено. В биохимической гепатограмме отмечено повышение уровня холестерина до 6,53 ммоль/л. Комплекс серологических реакций к Treponema pallidum отрицательный. Антитела к ВИЧ, гепатитам В и С не обнаружены.
На консилиуме дерматовенерологов в клинике ГБУ СО «УрНИИДВиИ» у больной было заподозрено онкологическое заболевание кожи, в связи с чем рекомендовано проведение инцизионной биопсии кожи из области очага. Однако в связи с тем, что больная категорически отказалась от биопсии кожи и не подписала добровольное информированное согласие на данную манипуляцию, нами была выполнена КЛСМ in vivo на микроскопе Vivascope 1500 (Германия).
По данным КЛСМ, у пациентки З. были выявлены признаки опухолевого процесса: наблюдалось фокальное осевое удлинение кератиноцитов, формирующее нарушение архитектоники эпидермиса и дермы (симптом «потока»); выявлялись дилатированные капилляры с усиленным кровотоком; визуализировались многочисленные округлые атипичные клетки, предположительно лимфоциты; фиксировались множественные опухолевые инфильтраты, разрушающие стромальное строение дермы (рис. 2, 3). Рис. 2. Больная З. КЛСМ эпидермо-дермального сочленения пораженного участка кожи. Наблюдается нарушение архитектоники эпидермиса и дермы (симптом «потока»), выражающийся в фокальном осевом удлинении кератиноцитов (красный прямоугольник); поперечно дилатированные капилляры с усиленным кровотоком (синие звезды). Рис. 3. Больная З. КЛСМ пораженного участка кожи (глубина 94,5 мкм). Визуализируются округлые атипичные клетки, предположительно лимфоциты (зеленые звезды), множественные опухолевые инфильтраты, разрушающие стромальное строение дермы (желтые прямоугольники). Полученные данные КЛСМ позволили нам убедить пациентку в необходимости проведения биопсии кожи для окончательной верификации диагноза.
Результаты патоморфологического исследования биоптата кожи. Эпидермис без существенных изменений. В дерме плотный диффузный инфильтрат без признаков эпидермотропности, образованный крупными лимфоидными клетками с амфофильной цитоплазмой, округлыми и овальными ядрами. Отмечается высокий уровень митоза и апоптоза клеток пролиферата (рис. 4). Рис. 4. В дерме диффузный инфильтрат из лимфоидных клеток, преимущественно крупного размера, с ядрами вариабельной формы и высокой митотической активностью. Эпидермотропизм не выражен. Ув. 400.
Иммуногистохимическое исследование биоптата кожи: клетки опухоли диффузно экспрессируют CD20 (L26) и не экспрессируют CD3 (SP7), Bcl-2 (100/D5), CD10 (56C6), CD30 (Ber-H2). Определяется минимальное количество реактивных Т-лимфоцитов (CD3+, Bcl-2+, CD20-). Индекс Ki-67 (SP6) — около 90% (рис. 5). Рис. 5. Большое количество крупных CD20+ лимфоцитов в дермальном инфильтрате. Интактный эпидермис, наличие grenz zone.
Заключение: гистологическое строение и иммунофенотип опухоли соответствуют первичной кожной диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфоме, Bcl-2 негативной.
На основании анамнеза заболевания, клинических и патоморфологических данных, результатов иммуногистохимического исследования биоптата кожи больной был установлен окончательный нозологический диагноз: первичная кожная диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома, тип другая, Bcl-2 негативная, IA (Ann Arbor). Больная была направлена на лечение к гематологу.
В городском гематологическом центре в результате проведенных двух курсов полихимиотерапии по протоколу R-CHOP был достигнут полный регресс опухоли (рис. 6). Рис. 6. Состояние больной З. после двух курсов полихимиотерапии. Пациентка находится под наблюдением у гематолога по месту жительства.
Представленный клинический случай демонстрирует, что метод КЛСМ может быть успешно реализован в качестве предварительной диагностики на предбиопсийном этапе, поскольку позволяет без нарушения целостности кожных покровов выявить патоморфологические признаки цитоархитектоники эпидермиса и дермы при первичных кожных лимфомах, а в определенных клинических ситуациях помогает аргументировать необходимость проведения клинико-лабораторного обследования с использованием гистологических и иммуногистохимических методов исследования биоптата кожи.
КОНФОКАЛЬНАЯ ЛАЗЕРНАЯ СКАНИРУЮЩАЯ МИКРОСКОПИЯ В ДИАГНОСТИКЕ БАЗАЛЬНОКЛЕТОЧНОГО РАКА КОЖИ.
Потекаев Н.Н., Ткаченко С.Б., Индилова Н.И.
Лаборатория по изучению репаративных процессов в коже НИИ Молекулярной медицины Первого МГМУ им. И.М.Сеченова, Москва
Злокачественные новообразования кожи занимают одно из лидирующих мест в структуре выявляемых опухолей. Важным фактом является то, что опухоли кожи являются часто встречаемыми в социально-активной и социально-востребованной группе населения в возрасте 30-59 лет – 9,7% (третье место в структуре заболеваемости в данной возрастной категории). Среди диагностируемых опухолей превалирует базальноклеточный рак кожи, доля которого в структуре немеланоцитарных злокачественных опухолей кожи составляет порядка 80%. Особенностями базалиомы являются длительное течение с излюбленной локализацией на открытых участках кожного покрова с преобладанием на таких социально-значимых областях, как нос, лобно-височная область и другие зоны. Последние исследования показали частую встречаемость длительно существующих базалиом – от 6 до 12 лет, что говорит о низкой онкологической настороженности, как у врачей различных специальностей, так и у самих пациентов. Таким образом, базалиома кожи является важной медико-социальной про
блемой. Поэтому важным становится своевременная диагностика с высокой степенью достоверности, позволяющая сократить число запущенных случаев, а значит и снизить риск глубокой инвазии и рецидива опухоли, тем самым улучшая качество жизни пациентов после проведенного лечения.Инновационным методом диагностики кожи является конфокальная лазерная сканирующая микроскопия - единственный из существующих на данный момент неинвазивных методов диагностики, который позволяет получить изображение кожи с разрешением, приближенным к традиционной световой микроскопии. Данный метод является незаменимым при верификации опухолей, локализующихся на лице и других открытых участках тела, где проведение диагностических биопсий потребует соблюдения эстетических норм, что во многих случаях не является возможным.
С помощью конфокальной микроскопии проводится послойное изучение горизонтальных плоскостей ткани до 5 мкм с возможностью оценки толщины и архитектоники каждого слоя кожи, анализа их клеточного состава, васкуляризации сосочковой дермы, площади распространения и степени инвазии опухолевого конгломерата до верхних уровней сетчатого слоя дермы. Метод позволяет без нарушения кожных покровов непосредственно на приеме выявить характерные патоморфологические признаки базальноклеточного рака кожи, что значительно облегчает верификацию этой опухоли кожи.В рамках нашего исследования были обследованы 94 пациента в возрасте 33-89 лет с новообразованиями кожи, всего 188 образования, из которых 124 элемента локализовались на коже головы. У 64 пациентов был диагностирован базальноклеточный рак кожи на основании данных, полученных с помощью конфокальной лазерной микроскопии и подтвержденных дальнейшим патоморфологическим исследованием. При этом выявляемые при лазерном сканировании характерные патоморфологические признаки базалиомы полностью коррелировали с таковыми при классическом гистологическом исследовании.В патоморфологический паттерн базальноклеточного рака
кожи при конфокальной лазерной сканирующей микроскопии вошли критерии, обладающие наиболее высокими значениями чувствительности и специфичности. К ним относятся следующие признаки: наличие удлиненных веретенообразных ядер базалиоидных клеток с характерной пространственной ориентацией – т.н. поляризацией, повышение васкуляризации тканей перитуморальной стромы и др. Данные критерии при построении ROC-кривых и расчете «площади под кривой» являются значимыми (при р≤0,0001), что подтверждает их высокую диагностическую ценность при верификации базальноклеточного рака кожи.
При статистической обработке данных нашей работы были оценены как каждый конфокальный критерий базальноклеточного рака кожи в отдельности, так и их сочетания. В результате, метод конфокальной лазерной сканирующей микроскопии показал высокие значения чувствительности и специфичности – 94% и 90% соответственно. Значимыми были и другие операционные характеристики метода – прогностическая ценность положительного (95%) и отрицательного (87%) результатов, что показывает ценность конфокальной микроскопии при скрининговых исследованиях и при дифференциальной диагностике в сложных клинических случаях.Таким образом, конфокальная лазерная сканирующая микроскопия является на настоящий момент уникальным диагностическим методом, обладающим высокой чувствительностью и специфичностью, позволяющим верифицировать базальноклеточный рак кожи без нарушения кожных покровов непосредственно на этапе диагностирования и определить дальнейшую тактику ведения пациента в самые короткие сроки после постановки диагноза.
В Профессорской клинике «Президентмед» представлены все самые современные виды инструментальной диагностики.
Эволюция кинематографа из 2D в 3D не прошла стороной мимо других сфер деятельности, потому что до недавнего времени система Vision была знаменита своей, так называемой, двухмерной или 2D-моделью для диагностики. Нетрудно догадаться, что охват обрабатываемого участка с нескольких сторон даст куда больший эффект, нежели «наблюдение с одного ракурса».
CLEAR VISION 3D – САМАЯ ФЕНОМЕНАЛЬНАЯ И НОВАЯ РАЗРАБОТКА В ОБЛАСТИ ДИАГНОСТИКИ НА СЕГОДНЯШНИЙ ДЕНЬ, ВПИТАВШАЯ ВСЕ ПРЕИМУЩЕСТВА СОБРАТА ПОСТАРШЕ И ПРЕУМНОЖИВШАЯ ИХ В ТЫСЯЧИ РАЗ!
«3D» в нашем случае – не дань моде, а наглядное подтверждение технического прогресса. Установка позволяет производить трёхмерное сканирование лица клиента с помощью осуществления единственного короткого снимка. За качество можно не беспокоиться, так как аппарат оснащён шестью камерами высочайшего разрешения, расположенными под тремя углами, что дарит нам изображения с обеих сторон (профиль и анфас) одновременно за один снимок. Если время – деньги, то Clear Vision 3D понимает это, как никто другой!
Мысли подвергнуть анализу обычную фотографию, сделанную в студии, не суждено долго прибывать в мире живых, потому что оборудование использует специальные UV-фильтры для обретения контрастных изображений, позволяющих отследить любых нарушителей покоя лица, будь то пигментные пятна, акне, морщины, шрамы, а также микрососуды и различные проблемы кожи, связанные с нарушениями васкулярной системы и другие.
Вся добытая информация о фактуре и состоянии кожи пациента обрабатывается мощной, но простой в обращении программой. Это могущественное приложение способно сравнивать снимки, произведённые в разное время (до и после косметологических процедур), а также измерять участки на поверхности лица, используя специальную программную функцию, сопоставляя изображения до знакомства с Clear Vision 3D и после.
Система превращается в иллюстратора вашего будущего, ведь на основе полученных данных строится прогноз о состоянии кожи по прошествии длительного времени.
С момента начала процедуры будет осуществляться персональная цифровая летопись всего происходящего: программа заполнит электронную форму всеми данными пациента, а также набором из шести фотографий под разными ракурсами.
Естественно, бланк сохранится файлом в базу данных и передастся клиенту. Его, как и любой файл, можно будет подвергнуть печати или передаче по всемирной паутине.
Воспользовавшись clear vision 3d, откройте для себя самую подробную историю ваших личных проблем с кожей лица, чтобы подвергнуть её тотальному очищению!
Дерматоскопия — это неинвазивный метод визуальной диагностики кожи, который благодаря использованию высоких технологий позволяет перейти от субъективной оценки состояния кожного покрова к объективной и документировать выявленные изменения кожи.
Суть метода состоит в том, что с помощью специального прибора — дерматоскопа при 10-кратном увеличении исследуются поверхностные слои кожи. Это позволяет более основательно изучить симметричность новообразования, его границы, структуру.
ТОЛЬКО В НАШЕЙ КЛИНИКЕ ВСЕ ВИДЫ ДЕРМАТОСКОПИИ!
ARAMO TS
ARAMO TS АППАРАТ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ КОЖИ И ВОЛОС.
3 режима работы: Нормальный режим 1, Нормальный режим 2, Режим с поляризацией
Измеритель влажности производит анализ уровня содержания влажности в коже.
Датчик определяет уровень эластичности кожи для диагностики ее состояния.
При помощи сенсора определяется жирность кожи в разных зонах и тип кожи: сухая, нормальная, жирная или комбинированная.
Дерматоскопия информативна при:
- Высыпаниях или новообразованиях кожи, содержащих меланин
- Диф.диагностике поражений кожи меланоцитарной и немеланоцитарной природы
- Высыпаниях или новообразованиях кожи сосудистой природы, содержащих гемоглобин и гемосидерин
- Высыпаниях или новообразованиях кожи, обусловленных нарушением кератогенеза, фиброзом
- Паразитарных заболеваниях кожи, а также заболеваниях волос и ногтей
Семиотика дерматоскопических поражений кожи
Дерматологическая картина различных дерматологических состояний
VIVASCOPE® 1500 MULTILASER — Самый точный диагностический прибор в дерматологии, дерматоонкологии и косметологии. Конфокальный лазерный сканирующий микроскоп для гистологического исследования кожи in vivo с помощью флуоресценции с использованием лазеров 3 длин волн (785 нм, 658 нм, 445 нм)
- Комбинирование технологии регистрации отраженного лазера и флуоресценции
- Оптическая неинвазивная биопсия
- Отображение в реальном времени
Система VivaScope 1500 Multilaser сочетает технологию регистрации отраженного лазера с флуоресцентной конфокальной лазерной сканирующей микроскопией. Аналогично стандартному устройству VivaScope 1500, участки кожи могут быть просмотрены in vivo в инфракрасном диапазоне. Используются следующие длины волн: 785 нм (ближняя инфракрасная область), 658нм (красный) или 445 нм (синий). Все три лазера интегрированы в одном устройстве.
Перед использованием VivaScope на участок ткани, который необходимо исследовать, наносится флуоресцентный краситель(нетоксичный для организма). Соответствующее лазерное излучение возбуждает флуорофор и появляющаяся флуоресценция позволяет получить контрастное изображение, помогающее отобразить гистологическую структуру благодаря распределению красителя.
С VivaScope 1500 Multilaser возможно отображение различных функциональных аспектов изменения тканей in vivo. Живая ткань может быть визуально исследована последовательно с использованием всех доступных длин волн лазерного излучения.
Немецкая компания Taberna pro medicum — создатель уникального направления ультразвукового сканирования в дерматологии. Ёще в начале 80-х гг. XX века компания TPM впервые провела масштабные исследования совместно с университетами Берлина, Бохума и Гамбурга, результатом которых стал выпуск первого в мире ультразвукового сканера для кожи. Благодаря постоянному сотрудничеству с обществом дерматологов Германии, компания TPM создала приборы с частотой сканирования до 100 МГц, не имеющие аналогов в мире. Компания TPM является крупнейшим мировым производителем ультразвуковых систем экспертного класса, а также занимает лидирующее положение по производству и продаже систем визуализации кожи.
Качество изображения, обработка сигнала и программное обеспечение дают неоспоримое преимущество перед другими производителями. TPM — единственный в мире производитель датчиков 75 и 100 МГц с самой высокой разрешающей способностью до 16 мкм. Ультразвуковые сканеры DUB-TPM, ставшие «золотым стандартом» в диагностике кожи, используют практически все ведущие научные и медицинские центры Европы и мира. Сегодня Вы можете пройти ультразвуковое исследование кожи на приборах DUB-TPM во многих научно-исследовательских центрах России.
Определение и информация о методе
Ультразвуковая визуализация высокого разрешения — это новый метод неинвазивной диагностики кожи, который применяют дерматологи, онкологи, косметологи, а также аллергологи, ревматологи, хирурги и др.
До настоящего времени основными методами диагностики кожи были осмотр и пальпация и гистологическое или патоморфологическое исследование. Ультразвуковая диагностика кожи заполняет пробел, который существовал ранее между наружными методами исследования и гистологией.
Это единственный на сегодняшний день метод, который позволяет без повреждения видеть морфологию кожи in vivo.
Кожа в норме. 22 МГц
Изучение морфологии кожи in vivo, а также мониторирование состояния кожи в норме и при патологии, широко применяются в дерматологии, косметологии, онкологии и дерматоонкологии, пластической хирургии.
Ультразвуковое диагностическое сканирование – хорошо известная и отработанная методика, которая в настоящее время составляет более 1/3 всех диагностических процедур в медицинской практике. Современные приборы достаточно просты в применении и доступны для большинства медицинских учреждений. Однако, в дерматологии эти исследования ранее не применялись, что было связано с трудностью технического решения данной задачи. В обычных приборах датчики имеют частоту 3-10 MГц, при которой невозможно получить изображение структур эпидермиса, дермы и гиподермы.
Демонстрация метода ультразвуковой диагностики
Читайте также: