Фермент тирозиназа при витилиго

Обновлено: 18.04.2024

Дизрегуляция пигментообразования в меланоцитах является одним из неприятных осложнений гормональных изменений во время беременности и после родов, а также на фоне приема гормоносодержащих препаратов в перименопаузе. Гиперпигментация кожи может быть вызвана нарушениями меланинового обмена, заболеваниями печени, почек, кроме того, быть следствием воздействия ультрафиолетового излучения. В статье рассмотрены механизмы защитного воздействия молекулярных компонентов экстрактов плаценты человека на ранозаживление и пигментообразование. Приведены данные экспериментальных и клинических исследований, подтверждающих возможность использования стандартизированных экстрактов плаценты не только непосредственно в эстетической медицине, но и в акушерстве и гинекологии в качестве эффективной защиты от избыточного пигментообразования.

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: молекулярные компоненты, экстракты плаценты, пигментация кожи, пигментные пятна беременных, гиперпигментация постакне, ятрогенная гиперпигментация, Лаеннек, Курасен

Рис. 1. Кожа в месте повреждения после применения препарата Лаеннек, 30-е сутки эксперимента: а – формирование волосяных фолликулов в рубцовой ткани недалеко от краевой зоны рубца; б – закладка сальной железы; в – коллагеновые волокна лежат рыхло и паралл

Рис. 2. Пространственные структуры цинксодержащих плацентарных белков: а – соматотропина (PDB 1bp3), б – толлоидного белка (белка морфогенеза кости 1, PDB 3edg)

Рис. 5. Пространственная структура тирозиназы – фермента, необходимого для синтеза меланина (PDB 1WX3) (cферы желтого цвета – атомы меди в активном центре фермента)

Нарушения пигментации кожи могут осложнять терапию эстрогенсодержащими препаратами у пациентов всех возрастов, имеющих как светлую, так и темную кожу, а также у лиц, склонных к угревой сыпи, и беременных. Несмотря на то что гиперпигментация может проявляться в молодом возрасте, ее относят к характерным признакам преждевременного старения кожи. Гиперпигментация кожи после акне, родов и при приеме заместительной гормональной терапии с трудом поддается лечению, особенно у пациентов с относительно темным цветом кожи.

Первая линия терапии гиперпигментации подразумевает применение депигментирующих средств и защиту кожи от избытка солнечного излучения. Известно, что, например, в период беременности и лактации рекомендуется меньше пребывать на солнце, пользоваться специальными защитными кремами и эмульсиями. В случае развития гиперпигментации в качестве депигментирующих средств используются ингибиторы тирозиназы: гидрохинон, азелаиновая и койевая кислоты, арбутин, экстракт солодки, ретиноиды, аскорбиновая кислота, ниацинамид и экстракты сои [1]. Могут применяться также мази на основе гидрохинона. Однако большинство лекарственных средств запрещено к использованию у беременных по причине недоказанной безопасности для плода. Даже местное применение мазей на основе гидрохинона может вызывать побочные эффекты: раздражение, аллергический контактный дерматит, обесцвечивание ногтей и гипопигментацию нормально окрашенных участков кожи [2].

Одним из перспективных направлений терапии нарушений пигментации кожи считается применение стандартизированных экстрактов плаценты человека (ЭПЧ), которые содержат многочисленные ростовые факторы и другие биологически активные компоненты.

Препараты на основе экстрактов плаценты человека

Следует подчеркнуть, что экстракт плаценты человека входит в состав многих лекарственных препаратов и косметических средств. Рекомендовать к применению следует только сертифицированные лекарственные средства – стандартизированные экстракты плаценты с доказанной эффективностью и безопасностью применения. Одним из таких препаратов является Лаеннек (Japan Bioproducts Industry Co., Ltd, Япония). Лаеннек – это первый плацентарный препарат для инъекций, разрешенный к применению на территории РФ с 2003 г. в качестве гепатопротектора, с 2008 г. – в качестве иммуномодулятора (регистрационное удостоверение № 013851/01–2008).

В процессе производства Лаеннека ведется контроль количественного содержания определенных компонентов (аминокислот, микроэлементов), являющихся не только маркерами качества очистки, но и действующими веществами препарата. Особенностью производства Лаеннека является молекулярное фракционирование, гарантирующее содержание в конечном экстракте веществ, в том числе белков и гормонов, с молекулярной массой от 200 до 100 000 Да. В состав препарата Лаеннек входит более 50 водорастворимых компонентов, включая факторы роста, цитокины, эритропоэтин, интерферон, аминокислоты, витамины (В₂, В₃, С, D, РР) и микроэлементы (прежде всего цинк).

Лаеннек вводят внутривенно капельно медленно в дозе 4,0–6,0 мл на 250,0 мл физиологического раствора или внутримышечно по 2,0 мл. В настоящее время процедуру регистрации проходит мезотерапевтический препарат ЭПЧ Курасен, разработанный на основе Лаеннека, эффективность препарата Курасен уже подтверждена рядом клинических исследований.

Клинические и экспериментальные исследования экстрактов плаценты

Благодаря работам выдающегося российского ученого В.П. Филатова по тканевой терапии экстракты плаценты начали использоваться в современной клинической медицине уже в первой четверти ХХ века. Систематический анализ клинической и экспериментальной фармакологии экстрактов плаценты человека показал их эффективность в иммунокоррекции, ранозаживлении, нейротрофической терапии, гепатопротекции и нормализации пигментации кожи [3].

1. Nishidate I., Aizu Y., Mishina H. Estimation of melanin and hemoglobin in skin tissue using multiple regression analysis aided by Monte Carlo simulation // J. Biomed. Optics. 2004. Vol. 9. № 4. Р. 700–710.

2. Grimes P.E. Melasma. Etiologic and therapeutic considerations // Arch. Dermatol. 1995. Vol. 1. № 12. Р. 1453–1457.

3. Громова О.А., Торшин И.Ю., Диброва Е.А. и др. Мировой опыт применения препаратов из плаценты человека: результаты клинических и экспериментальных исследований // Пластическая хирургия и косметология. 2011. № 3. С. 385–576.

4. Briguglio A. On 100 cases of surgical diseases treated with a cold-sterilized placental extract // Minerva Med. 1962. Vol. 53. Р. 3118–3123.

5. Shukla V.K., Rasheed M.A., Kumar M. et al. A trial to determine the role of placental extract in the treatment of chronic non-healing wounds // J. Wound Care. 2004. Vol. 13. № 5. Р. 177–179.

6. Жидоморов Н., Суракова Т., Гришина Т. и др. Экспериментальное исследование влияния препарата Лаеннек на процессы регенерации // Les Nouvelles Esthetiques. 2001. № 3. С. 6–9.

7. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под ред. Р.У. Хабриева. М.: Медицина, 2005. 832 с.

8. Mal'tsev V.I., Kaliuzhnaia L.D., Gubko L.M. Experience in introducing the method of placental therapy in vitiligo in Ukraine // Lik. Sprava. 1995. № 7–8. Р. 123–125.

10. Janitz M., Heiser V., Böttcher U. et al. Three alternatively spliced variants of the gene coding for the human bone morphogenetic protein-1 // J. Mol. Med. (Berl.). 1998. Vol. 76. № 2. Р. 141–146.

11. Su A.I., Wiltshire T., Batalov S. et al. A gene atlas of the mouse and human protein-encoding transcriptomes // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2004. Vol. 101. № 16. Р. 6062–6067.

12. Lee S.W., Kim S.H., Kim J.Y. et al. The effect of growth hormone on fibroblast proliferation and keratinocyte migration // J. Plast. Reconstr. Aesthet. Surg. 2010. Vol. 63. № 4. Р. e364–369.

13. Rattenholl A., Pappano W.N., Koch M. et al. Proteinases of the bone morphogenetic protein-1 family convert procollagen VII to mature anchoring fibril collagen // J. Biol. Chem. 2002. Vol. 277. № 29. Р. 26372–26378.

14. Yang T., Mendoza-Londono R., Lu H. et al. E-selectin ligand-1 regulates growth plate homeostasis in mice by inhibiting the intracellular processing and secretion of mature TGF-beta // J. Clin. Invest. 2010. Vol. 120. № 7. Р. 2474–2485.

15. Loeys B.L., Chen J., Neptune E.R. et al. A syndrome of altered cardiovascular, craniofacial, neurocognitive and skeletal development caused by mutations in TGFBR1 or TGFBR2 // Nat. Genet. 2005. Vol. 37. № 3. Р. 275–281.

16. Kovacs D., Cardinali G., Aspite N. et al. Role of fibroblast-derived growth factors in regulating hyperpigmentation of solar lentigo // Br. J. Dermatol. 2010. Vol. 163. № 5. Р. 1020–1027.

17. Mallick S., Singh S.K., Sarkar C. et al. Human placental lipid induces melanogenesis by increasing the expression of tyrosinase and its related proteins in vitro // Pigment. Cell. Res. 2005. Vol. 18. № 1. Р. 25–33.

18. Pal P., Mallick S., Mandal S.K. et al. A human placental extract: in vivo and in vitro assessments of its melanocyte growth and pigment-inducing activities // Int. J. Dermatol. 2002. Vol. 41. № 11. Р. 760–767.

19. Каримова И., Кустова Е., Гилельс А. Плацентарный препарат CURACEN в мезотерапии стареющей кожи // Инъекционные методы в косметологии. 2011. № 3. С. 43–47.

20. Parvez S., Kang M., Chung H.S. et al. Survey and mechanism of skin depigmenting and lightening agents // Phytother. Res. 2006. Vol. 20. № 11. Р. 921–934.

Effects of placental extracts on skin pigmentation: experience with Laennec and Curacen

A.V. Gilels1, V.I. Demidov2, N.Yu. Zhidomorov2, I.Yu. Torshin3, 4, O.A. Gromova2, 4

1 RHANA Clinic, Moscow

2 Ivanovo State Medical Academy of the Ministry of Health of Russia

3 Dorodnicyn Computing Centre of RAS

4 Trace Element – Institute for UNESCO, Moscow

Hormonal changes during pregnancy or hormone therapy in perimenopause commonly result in dysregulation of melanogenesis in melanocytes. Skin hyperpigmentation may be due to abnormal melanin metabolism, liver and kidney disorders, or ultraviolet radiation. The article addresses mechanisms of protective effects of human placental extracts on wound healing and melanogenesis. The results of experimental and clinical studies highlight the usefulness of standardized placental extracts not only in aesthetic medicine, but also in obstetrics and gynecology for the prevention of hyperpigmentation.

Обычно дерматологи своим пациентам с витилиго дают следующие советы.

Вам необходимо защищать кожу от солнца, потому что:

- под воздействием солнца ее поверхностный слой очень легко теряет пигмент меланин;

- чрезмерный загар может еще больше усилить проявления витилиго;

- при светлой коже пятна витилиго едва заметны, а на фоне загара они «проявятся»;

- если вы выбрали для лечения витилиго метод депигментации, при котором кожа осветляется, почти теряя естественный цвет, УФ-излучение может спровоцировать появление «цветных» пятен на ней, и вам придется вновь делать депигментацию.

Чтобы защитить кожу от солнца, дерматологи рекомендуют:

1) использовать солнцезащитный крем;

Щедро наносите крем с УФ-фильтрами на кожу, не покрытую одеждой, каждый день и не позднее чем за 15 минут до выхода на улицу. Лучше для этого выбрать средство со следующими характеристиками:
надписью UVA/UVB (это говорит о широком спектре защиты);
SPF 30 и более;
водостойкостью.

Не забудьте повторно нанести солнцезащитный крем, если вы длительно находитесь на открытом воздухе: в пасмурные дни — каждые два часа, и каждый раз после того, как вы были в воде или пропотели.

2) носить одежду, которая защищает кожу от солнца;

Кожу, покрытую тканью, которая имеет высокий SPF (sun protection factor — солнцезащитный фактор), не нужно мазать солнцезащитным кремом. Однако не вся ткань защищает одинаково. Например, джинсовая рубашка с длинным рукавом имеет SPF около 1700, а белая футболка — только 7. Причем интересно, что у такой же зеленой футболки SPF возрастает до 10.

Повысить SPF одежды можно, добавляя специальные средства во время стирки. Но, к сожалению, этот процесс должен быть длительным — SPF заметно увеличивается приблизительно после 20 стирок.

3) стараться подольше находиться в тени;

Это особенно важно в часы, когда ваша тень короче, чем вы. Ближе к полудню солнечные лучи наиболее опасны и максимально способствуют образованию загара.

4) не пользоваться солярием.

Вопреки расхожему мнению, солярий вовсе не безопасная альтернатива солнцу. Специальные лампы, которые применяются в соляриях, тоже могут обжечь кожу, потерявшую пигмент.

Если же вы все-таки хотите добавить цвета вашей коже, то пользуйтесь для этого косметикой. Средства, с помощью которых можно придать коже желаемый цвет, можно разделить на три типа. Это различные кремы-автозагары, природные красители и собственно декоративная косметика.

Ниже приведены некоторые советы, которые дерматологи дают своим пациентам с витилиго перед применением декоративных средств для изменения цвета кожи.

Выбирайте только водостойкую продукцию.

Эффект от применения автозагаров и красителей дольше, чем от тональных косметических средств, к тому же красители лучше подходят для белых пятен.

Когда выбираете крем-автозагар, отдайте предпочтение тому, который содержит дигидроксиацетон.

При регулярном применении большинство пациентов могут добиться естественного вида кожи, используя маскирующие кремы или автозагары.

Не делайте татуировки, потому что их нанесение может вызвать кебнеризацию — появление пятен витилиго на месте татуажа спустя 10–14 дней.

В заключение всем людям с проявлениями витилиго можно посоветовать узнать как можно больше об этом заболевании. Ведь знание проблемы часто улучшает качество жизни человека — имея представление о вариантах лечения и его эффективности, он не впадет в депрессию, а будет действовать или спокойно жить, не обращая внимания на свою «изюминку». Можно лечить витилиго, маскировать пятна с помощью косметики или ничего не делать, оставив все как есть. Только вы можете выбрать, что подходит именно вам.

Если даже вы решили не лечить витилиго, на всякий случай покажитесь дерматологу для точной диагностики и проведения медицинского осмотра. Ведь витилиго является медицинским состоянием, беспокоящим не только как косметический дефект.

Очень важно также общаться с другими людьми, страдающими витилиго. Особенно это нужно детям, которых сверстники часто дразнят и задирают, а невоспитанные взрослые могут пристально рассматривать. Чтобы избежать эмоциональных проблем, имеет смысл чаще проводить время с людьми, которые также страдают витилиго. Они не будут воспринимать ваш внешний вид как что-то необычное, а сосредоточатся на ваших личностных качествах.

ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздравсоцразвития РФ, Москва

Российский государственный медицинский университет, Москва

Российский государственный медицинский университет им. Н.И. Пирогова

Современный взгляд на проблему лечения витилиго

Журнал: Клиническая дерматология и венерология. 2012;10(2): 118‑123

Усовецкий И.А., Шарова Н.М., Короткий Н.Г. Современный взгляд на проблему лечения витилиго. Клиническая дерматология и венерология. 2012;10(2):118‑123.
Usovetskiĭ IA, Sharova NM, Korotkiĭ NG. The current view of the problem of vitiligo therapy. Klinicheskaya Dermatologiya i Venerologiya. 2012;10(2):118‑123. (In Russ.).

ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздравсоцразвития РФ, Москва

Представлены результаты собственных исследований, посвященных особенностям клинического течения разных форм витилиго, некоторым патогенетическим аспектам развития данного заболевания и оценке клинической эффективности комплексной терапии сегментарной и несегментарной формы витилиго.

ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздравсоцразвития РФ, Москва

Российский государственный медицинский университет, Москва

Российский государственный медицинский университет им. Н.И. Пирогова

Витилиго характеризуется внезапным возникновением депигментированных пятен вследствие нарушения секреторной функции меланоцитов или их гибели, развивается у лиц с генетической предрасположенностью, сопровождается выраженными дисрегуляторными изменениями клеточно-опосредованных реакций иммунной системы, вегетативного дисбаланса с преобладанием симпатического тонуса и серьезной социальной дезадаптацией, обусловленной личностными особенностями и внешними социальными факторами.

Витилиго является распространенным дерматозом. В мире число больных с данным заболеванием превышает 1% всего населения. В 70% случаев заболевание начинается в возрасте 10—25 лет, дети младше 10 лет, в том числе новорожденные и грудного возраста, составляют приблизительно 25% всех больных витилиго [1]. Витилиго может возникнуть в любом возрасте, длиться неопределенно долго, самопроизвольное восстановление нормальной окраски кожи наблюдается редко.

Причины появления депигментированных очагов не известны. Недостаточно понятно, в результате каких нарушений резко прекращается синтез меланина и погибают меланоциты. Разные эндогенные и экзогенные факторы могут оказывать прямое и опосредованное повреждающее действие на меланоциты.

Среди внешних факторов наибольшее значение придают инфекционным и токсическим агентам, чрезмерному ультрафиолетовому облучению, стрессам. На протяжении многих десятилетий витилиго связывали с аутоиммунным тиреоидитом, ревматоидным артритом, красной волчанкой, атопическим дерматитом, заболеваниями печени инфекционного или токсического генеза, глистной инвазией и рядом врожденных синдромов [2]. Однако частота встречаемости витилиго у этих больных не выше, чем в популяции в целом. Ряд авторов [3, 4], подводя итоги многолетним исследованиям, считают, что больные витилиго в большинстве случаев не имеют никаких тяжелых или хронических сопутствующих заболеваний, а терапия выявленных у 28% больных функциональных расстройств органов пищеварения, вегетососудистой дистонии не оказывала влияния на результат репигментации.

Многие исследователи считают [5, 6], что витилиго является серьезным косметическим дефектом, возникает у лиц с генетической предрасположенностью и в у большинстве случаев, перенесших эмоциональные расстройства. Лишь у 4—7% больных витилиго сочетается с аутоиммунным тиреоидитом.

В современных генетических исследованиях продемонстрирована связь возникновения витилиго с разными аспектами наследования. Среди спорадических случаев витилиго в европейской популяции средний возраст возникновения заболевания составляет 24,2 года, тогда как в семьях с множественными случаями заболевания средний возраст составляет 21,5 года (статистически достоверные различия) [7]. Более раннее начало заболевания в «семейных» случаях и риск заболевания у отдаленных родственников является типичной характеристикой полигенного заболевания. Около 20% больных витилиго имеют не менее одного кровного родственника с подобным заболеванием. Формально-генетический сегрегационный анализ витилиго определяет существование многих локусов, нарушения в которых формируют предрасположенность к витилиго. Однако не обнаружены ключевые гены, ответственные за манифестацию, прогрессирующее течение или предрасположенность к данному заболеванию.

При витилиго обнаружено снижение антиоксидантного потенциала, приводящего к активному повреждающему воздействию на меланоциты свободных радикалов и накоплению продуктов перекисного окисления липидов [8, 9]. Позднее выяснилось, что свободные радикалы оказывают повреждающее действие на разные клетки, участвующие в воспалительных реакциях разного типа, и нарушения антиоксидантной защиты не являются основными механизмами депигментации при витилиго.

Теория нарушений иммунных механизмов регуляции является наиболее обоснованной. При длительном течении и распространенном патологическом процессе наблюдаются изменения в субпопуляционном составе Т-лимфоцитов. Одновременно с этим, особенно на начальных стадиях заболевания, повышаются уровни активационных рецепторов лимфоцитов, отражающие степень активации иммунокомпетентных клеток [10]. В настоящее время большинство исследователей полагают, что ведущая роль в развитии аутоиммунных заболеваний принадлежит клеточно-опосредованным реакциям, при которых наблюдается выраженный дисбаланс цитокинов. При витилиго выявляется снижение активности регуляторных Т-лимфоцитов, что подтверждается уменьшением количества трансформирующего фактора роста-β (TGF-β) и интерлейкина-10 (ИЛ-10) в сыворотке крови больных [11].

Лечение витилиго является сложнейшей задачей. Так как причины его возникновения неизвестны, в большинстве случаев заболевание развивается на фоне полного физического благополучия. Предлагается применять в основном топические стероиды и/или иммуномодуляторы при площади поражения до 20%, а также длительную фототерапию [12, 13]. В комплексную терапию включают ферментные препараты, гепатопротекторы, витамины и микроэлементы (цинк, медь) [14, 15]. В ряде рекомендаций содержатся сведения о применении седативных и антидепрессивных средств.

Цель настоящего исследования — изучение клинических особенностей течения витилиго и эффективности комплексной терапии, включающей иммуномодулирующий компонент — тимоген и наружно 1% пимекролимус, и коррекцию аффективных расстройств у больных разными формами витилиго с использованием препарата антидепрессивного действия агомелатин.

Материал и методы

Все больные разными формами витилиго были полностью обследованы (проведены клинические анализы крови и мочи, биохимический анализ крови, ультразвуковое исследование органов брюшной полости и щитовидной железы, гормоны щитовидной железы Т₃, Т₄, тиреотропный гормон — ТТГ и антитела к тиреоидной пероксидазе — АТ-ТПО по показаниям, консультация невропатолога по показаниям, консультация психиатра, иммунологические исследования — популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов, уровень провоспалительных и регуляторных цитокинов).

Результаты

Под нашим наблюдением с 2006 по 2011 г. находились 84 больных витилиго (46 женщин, 38 мужчин) в возрасте от 18 до 56 лет.

Давность заболевания варьировала от 6 мес до 30 лет, средняя продолжительность составила 6,5±4,8 года. Среди вероятных причин развития витилиго большинство больных называли перенесенный стресс (39 пациентов, 46%). Витилиго возникло после оперативных вмешательств у 3 (3,5%) пациентов, после травм — у 4 (4,5%). По мнению 4 (5%) женщин, впервые депигментированные пятна появились у них после родов, в период лактации, причем 1 пациентка отмечала, что после 2- и 3-х родов увеличивалась площадь поражения и появлялись свежие очаги. У 14 (17%) больных заболевание возникло после воздействия длительного ультрафиолетового излучения, 20 (24%) пациентов не могли связать появление депигментированных пятен с какими-либо значимыми причинами (рис. 1). Рисунок 1. Вероятные причины развития витилиго. У 21 больного среди ближайших родственников имелись проявления витилиго разной давности и степени распространенности, у 2 из них, помимо поражений кожи были обесцвечены участки волос.

При обследовании больных витилиго обнаружено, что наиболее часто (у 48 больных, 57,1%) встречаются дискинезия желчевыводящих путей и желчекаменная болезнь, хронический холецистит, жировой гепатоз. Гастрит обнаружен у 16 (19%) больных. В процессе обследования патология щитовидной железы (аутоиммунный тиреоидит, диффузный токсический зоб, кисты щитовидной железы) выявлена или подтверждена у 13 (15,4%) больных витилиго. Только у 4 больных из 13 с патологией щитовидной железы были обнаружены АТ-ТПО, что подтверждало диагноз аутоиммунный тиреоидит.

Гинекологические заболевания (дисфункциональные нарушения менструального цикла, миома) обнаружены у 5 (5,9%) женщин. У 10 (11,9%) больных подтверждена гипертоническая болезнь I—II степени, у 1 (1,2%) выявлен сахарный диабет 2-го типа, у 3 (3,5%) обнаружено алиментарное ожирение II—III степени. Достоверных отклонений от нормальных значений в клинических анализах крови не обнаружено. Тяжелых хронических заболеваний или декомпенсированных состояний у больных витилиго не выявлено (табл. 1).

Мы наблюдали за больными с разными формами витилиго (табл. 2). Среди них 7 (8,3%) больных имели сегментарную форму с площадью поражения 2% (рис. 2). Рисунок 2. Сегментарная форма витилиго. Вульгарная форма наблюдалась у 44 (52,3%) больных. В этих случаях площадь поражения составляла 3—70% площади кожного покрова (рис. 3, а, б). Рисунок 3. Пациентка (а) и пациент (б) с вульгарной формой витилиго. Отдельную группу составили больные с акрофациальной формой (31 человек, 36,9%) с депигментированными очагами на лице и конечностях (рис. 4, а—в). Рисунок 4. Акрофациальная форма витилиго (а—в). У 10 (11,9%) пациентов при клиническом обследовании обнаружены невусы Сеттона (рис. 5). Рисунок 5. Невусы Сеттона.

Витилиго является серьезной психологической проблемой [16, 17]. При исследовании уровня тревожности методом Спилбергера—Ханина низкий уровень реактивной тревожности наблюдается у 52 (61,9%) больных, а у 32 (38,1%) — умеренно выраженная реактивная тревожность. У 55 (77,4%) больных витилиго отмечен высокий уровень личностной тревожности, причем он не зависел ни от площади поражения, ни от давности заболевания. Наличие депрессивных расстройств подтверждены с помощью госпитальной шкалы Гамильтона (средний показатель 13,9±2,4 балла) и шкалы Бека (средний показатель 22,4±2,8 балла). У большинства обследованных выявлялись депрессивные расстройства невротического уровня, характеризующиеся подавленностью настроения, нарушением сна, тревожными и астеническими проявлениями.

Таким образом, в ходе обследования каких-либо тяжелых сопутствующих заболеваний не выявлено. По данным литературы, аффективные и вегетативные нарушения наблюдаются практически у всех больных витилиго и требуют адекватной коррекции.

При иммунологическом исследовании, проведенном 25 больным витилиго, обнаружены достоверные отклонения от контрольных значений в субпопуляционном составе Т-лимфоцитов и дисбаланс провоспалительных цитокинов (табл. 3; рис. 6). Рисунок 6. Содержание цитокинов в сыворотке больных витилиго. Примечание. ИЛ-2, ИЛ-8, ФНО-α, ИФН-γ, ИЛ-10 в пг/мл; TGFβ, в нг/мл. Так, содержание CD8+ в крови больных витилиго было достоверно выше, чем у здоровых, иммунорегуляторный индекс (ИРИ) также имел достоверные отличия от контрольных значений. В сыворотке крови больных витилиго обнаружено повышенное содержание ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-8 и фактора некроза опухоли-α (ФНО-α), интерферона-γ (ИФН-γ) на фоне низкого уровня регуляторных цитокинов TGF-β и ИЛ-10 по сравнению с контролем.

Комплексное лечение больных проводили с учетом клинических особенностей витилиго, в том числе давности, распространенности и активности патологического процесса. Использовали направленную иммуномодулирующую терапию — тимоген (назальный спрей по 1 мл/сут в течение 20 дней) и пимекролимус (1% крем 2 раза в сутки в течение 4—6 мес). Психокорригирующую терапию проводили агомелатином, который является агонистом мелатонина (МТ₁- и МТ₂-рецепторов) и антагонистом 5НТ_2с. Агомелатин больные витилиго принимали по 25 мг/сут 1 раз в день не менее 6 нед. После консультации психиатра 5 больным с умеренно выраженными признаками депрессии агомелатин был назначен в суточной дозе 50 мг на 12—24 нед.

Мы провели комплексное лечение 57 больным разными формами витилиго (3 пациента — с сегментарной формой, 25 — с акрофациальной, 29 — вульгарной).

У всех больных с сегментарной формой витилиго 100% репигментация наблюдалась через 4 мес после начала терапии.

У больных акрофациальной формой полная клиническая ремиссия отмечена в 16 (64%) случаях через 5 мес терапии. Значительное улучшение со 100% репигментацией большинства очагов и уменьшением площади очагов депигментации более чем на 60% имелось у 7 пациентов. Незначительная эффективность отмечена у 2 больных, причем полностью восстановилась нормальная окраска кожи в периорбитальных и периоральной областях, на тыльной поверхности кистей и в области фаланг площадь депигментированных очагов практически не изменилась, частично (до 40%) уменьшилась площадь очагов в области голеностопных суставов.

Положительные изменения после проведенной комплексной терапии наблюдались у всех больных вульгарной формой витилиго. Клиническая ремиссия отмечалась у 20 из 29 больных данной группы.

В течение первых 3 мес терапии (12 нед) у этих пациентов началась активная репигментация очагов, площадь которых сокращалась на 30—60%. К концу 6-го месяца цвет кожи восстановился полностью.

У 6 больных наблюдалось сокращение площади депигментированных очагов на 50—70% за счет полной репигментации отдельных очагов и частичного восстановления нормального цвета кожи отдельных участков. У 3 пациентов отмечались незначительные позитивные изменения, которые выражались в восстановлении пигментации свежих, небольших по площади участков (не более 2 см 2 ), сглаживании границ по периферии очагов депигментации (табл. 4).

Все больные хорошо переносили лечение, побочных эффектов, осложнений, отказов от терапии не было. В процессе терапии удалось изменить отношение пациентов к своему заболеванию, оценить позитивные изменения в процессе лечения. На фоне активной репигментации очагов нормализовались иммунологические показатели и произошла редукция признаков депрессивных расстройств.

Таким образом, полученные нами результаты свидетельствуют о возможности обоснованного эффективного и безопасного лечения витилиго.

Витилиго — хроническое мультифакториальное заболевание из группы дисхромий, обусловленное нарушением функционирования меланоцитов в эпидермальных клетках и волосяных фолликулах. Распространенность дерматоза в мире составляет 0,5% [1]. Заболевание одинаково часто встречается у мужчин и женщин во всех возрастных группах, при этом расовые различия отсутствуют [2].

На современном этапе развития науки трансплантация аутологичных меланоцитов является перспективным направлением лечения витилиго. Однако при проведении меланоцитарной трансплантации необходимо строго учитывать критерии отбора пациентов: возраст пациента, клиническую форму витилиго, стадию заболевания, наличие/отсутствие феномена Кебнера и эффекта от других методов лечения витилиго [3].

Установлено, что в процессах меланогенеза важную роль играют белки сигнального пути Wnt. Эти пептиды, открытые еще в начале 1980-х гг. в качестве маркеров многих видов раковых заболеваний, считаются ключевыми регуляторами эмбрионального развития, процессов регенерации, роста костей, дифференцировки стволовых клеток и других процессов, связанных с морфогенезом и определением клеточной судьбы [4—9]. Сигнальный путь Wnt представляет собой сложную цепь внутриклеточных взаимодействий, соответственно, блокировка пути Wnt останавливает рост стволовых клеток и их созревание в нормально функционирующие меланоциты. Путь Wnt имеет значение как для формирования, так и для созревания меланоцитов, что подтверждает значимость его изучения при витилиго.

Белки семейства Wnt могут выступать в роли «регенераторов» меланоцитов, дифференцировка которых должна пройти ряд этапов, начиная с формирования предшественников меланоцитов. Наибольший интерес представляют 2 белка этого семейства — Wnt1 и Wnt3. Wnt1 воздействует на меланобласты, стимулируя увеличение количества зрелых меланоцитов, тогда как Wnt3 и β-cadenin в большей мере воздействуют на развитие и формирование меланоцитов.

Считается что, индуцирование белка Wnt1 у больных витилиго связано с дифференцировкой стволовых клеток — меланобластов в волосяных фолликулах. Wnt1 передает сигналы тремя отдельными путями: каноническим, опосредуемым Wnt/β-cadenin; неканоническим, включающим путь Wnt/Ca2 + , и путем клеточной полярности. Этот белок кодируется одноименным геном, который впервые был открыт как протоонкоген в опухоли молочной железы.

Сигнальный путь Wnt стимулирует пигментацию как кожи, так и волос [2]. Он является регулятором популяции стволовых клеток меланоцитов (McSC) и участвует в их выживании. В процессе клеточной дифференцировки под действием сигнального пути Wnt образуются бипотентные глиально-меланоцитарные стволовые клетки, которые при миграции в эпидермис преобразуются в меланоциты, продуцирующие пигмент [4, 10]. Таким образом, в волосяных фолликулах есть резервуары меланоцитов, которые предопределяют эффективность трансплантации аутологичных меланоцитов, полученных из волосяных фолликулов, в очаги депигментации [5].

Необходимость изучения белков семейства Wnt объясняется также тем, что активация сигнального пути Wnt может служить дополнительной стратегией для стимуляции репигментации у больных витилиго. Активация этого пути способствует дифференцировке меланоцитов в процессе лечения.

Цель исследования — оценка эффективности применения в лечении витилиго методов трансплантации аутологичных некультивированных меланоцитов с учетом уровня экспрессии в коже сигнального белка Wnt1.

Материал и методы

Под наблюдением находились 113 больных витилиго в возрасте от 21 года до 50 лет, обратившихся в Республиканский специализированный научно-практический медицинский центр дерматовенерологии и косметологии. Среди больных было 45 (39,8%) мужчин и 68 (60,2%) женщин. Несегментарная форма витилиго диагностирована у 81 (71,7%) больного, сегментарная — у 32 (28,3%).

У 63 пациентов выполнена трансплантация суспензии некультивированных эпидермальных клеток (Non-Cultured Epidermal Cell Suspension — NCECS), у 50 больных — трансплантация NCECS и клеток наружного корневого влагалища волосяных фолликулов (Non-Cultured Outer Root Sheath Hair Follicle Cell Suspension — NCORSHFS). У 70 больных и 10 здоровых лиц проведены иммуногистохимические исследования экспрессии белка Wnt1 в биоптатах кожи. Забор материала для трансплантации производили из участка непораженной кожи методом шейв-биопсии (shave biopsy). Перед пересадкой в очаге витилиго осуществляли дермабразию кожи с использованием сканера углекислотного лазера, позволяющего проводить абляцию и испарение (фракционную и нефракционную абляцию) с минимальным повреждением кожи.

У 70 больных и 10 здоровых лиц (контрольная группа) проведены иммуногистохимические исследования экспрессии белка Wnt1 в биоптатах кожи. С целью сравнительного анализа экспрессии белка Wnt1 больные разделены на 4 группы. В 1-ю группу вошли 20 больных витилиго, у которых исследование экспрессии Wnt1 + -клеток проводили до лечения в очагах депигментированной кожи. Вторую группу составили 10 пациентов, у которых оценивали экспрессию белка Wnt1 в волосяных фолликулах, полученных из биоптатов кожи затылочной области волосистой части головы (биоптаты забирали методом панч-биопсии). В 3-ю и 4-ю группы вошли по 20 пациентов, у которых экспрессию данного белка изучали в биоптатах, полученных из зон трансплантации соответственно NCECS и NCECS + NCORSHFS.

Анализ экспрессии белка Wnt1 в коже с использованием иммуногистохимического метода проводили согласно протоколу фирмы-разработчика «Prestige Polyclonal and Monoclonal» (США), включавшему следующие этапы исследования.

1. Депарафинизация — парафиновые срезы толщиной 4 мкм высушивали в течение 8 ч при температуре 37 °С, после чего проводили депарафинизацию срезов в ксилоле и дегидратацию в этаноле. После дегидратации в течение 5 мин проводили блокировку эндогенной пероксидазы в 0,3% растворе перекиси водорода (H₂O₂) на 95% этаноле.

2. Стандартный метод демаскировки антигена выполняли путем кипячения срезов в цитратном буфере (pH 6,0) в условиях высокого давления, в качестве источника тепла использовали систему Decloakingchamber (Biocare Medical, Walnut Creek, CA, США). Срезы, полностью погруженные в цитратный буфер, кипятили в течение 4 мин при температуре 125 °C в условиях высокого давления. После завершения тепловой обработки препараты со срезами оставляли в растворе буфера и остужали до температуры 90 °C. Общее время обработки около 45 мин.

3. Иммуногистохимическое окрашивание проводили в аппарате Autostainer 480. Инкубацию с антителами выполняли при комнатной температуре в течение 60 мин.

Оценку уровня экспрессии белка Wnt1 выражали в баллах в зависимости от количества клеток, экспрессировавших белок Wnt1: 0 баллов — отсутствие Wnt1 + -клеток; 1, 2, 3 и 4 балла выставляли при наличии количества клеток, составлявших соответственно менее 10, 11—50, 51—80 и более 80%.

Данные, полученные при статистической обработке, представляли в формате M±m. Различия считали статистически значимыми при p

Результаты и обсуждение

Рис. 1. Очаг витилиго до трансплантации суспензии некультивированных эпидермальных клеток (NCECS).

Рис. 2. Очаг витилиго после трансплантации суспензии некультивированных эпидермальных клеток (NCECS).

Рис. 3. Очаги витилиго до трансплантации суспензии некультивированных эпидермальных клеток и клеток наружного корневого влагалища волосяных фолликулов (NCECS + NCORSHFS).

Рис. 4. Очаги витилиго после трансплантации суспензии некультивированных эпидермальных клеток и клеток наружного корневого влагалища волосяных фолликулов (NCECS + NCORSHFS).

Сравнительная характеристика экспрессии в коже белка Wnt1 в обследованных группах больных, процент Wnt1+-клеток, M±m

1-я группа — депигментированная кожа до лечения (n=20)

2-я группа — волосяные фолликулы до лечения (n=10)

3-я группа — кожа в участках пересадки NCECS (n=20)

4-я группа — кожа в участках пересадки NCECS + NCORSHFS (n=20)

Кожа здоровых лиц (n=10)

Примечание. * — pp>0,05 — достоверность различий по сравнению с 1-й группой.

После лечения в группе трансплантации NCECS изменений экспрессии белка Wnt1 в зоне пересадки не наблюдали, тогда как в группе трансплантации NCECS + NCORSHFS количество Wnt1 + -клеток в зоне пересадки в 20 раз превышало таковое в депигментированной коже больных, обследованных до лечения (соответственно 41 и 2%), однако статистически значимо отличалось от значения показателя в контрольной группе (p<0,01).

Заключение

В исследовании показана высокая эффективность применения в лечении витилиго методов меланоцитарной трансплантации с использованием некультивированных клеточных суспензий. Установлен более высокий уровень экспрессии белка Wnt1 в зоне трансплантации суспензии некультивированных эпидермальных клеток и клеток наружного корневого влагалища волосяных фолликулов (NCORSHFS + NCECS) по сравнению со значением этого показателя в депигментированной коже больных, обследованных до лечения. По нашему мнению, это связано с тем, что волосяные фолликулы содержат 3 типа стволовых клеток: эпителиальные стволовые клетки, меланоцитарные стволовые клетки (MelSCs) и стволовые клетки нервного гребня (NCSCs). По всей видимости, наличие в волосяных фолликулах меланоцитарных стволовых клеток обеспечило более высокий терапевтический эффект в группе трансплантации NCORSHFS + NCECS, чем в группе пациентов, получавших трансплантацию некультивированных эпидермальных клеток (NCECS).

Кроме того, результаты исследования показали значимость изучения при витилиго состояния регуляторных белков сигнального пути Wnt, поскольку контролируемая активация этого пути может стимулировать рост и дифференцировку меланоцитов. Дальнейшие исследования участия белков семейства Wnt позволят определить перспективность фармакологической регуляции Wnt-каскада при лечении витилиго. Применение клеточной трансплантации некультивированных кератиноцитов и меланоцитов является перспективным направлением в лечении больных витилиго. Необходимо проведение дальнейших исследований с целью разработки технологий применения и изучения отдаленных результатов хирургического лечения витилиго.

Участие авторов:

Концепция и дизайн исследования — Сабиров У.Ю., Азимова Ф.В., Тоиров Б.А.

Сбор и обработка материала— Тоиров Б.А.

Статистическая обработка данных — Тоиров Б.А.

Написание текста— Тоиров Б.А., Муминова С.Р.

Редактирование— Тоиров Б.А., Муминова С.Р.

Authors’ contributions:

The concept and design of the study: Sabirov U.Yu., Azimova F.V., Toirov B.A.

Представлены современные данные литературы о влиянии окислительных процессов на механизмы меланогенеза и взаимосвязи оксидативных нарушений с биохимическими процессами, протекающими в коже при гипохромии. Приведен обзор применения экзогенной дисмутазы для коррекции оксидативного статуса кожи с нарушенным обменом меланина.

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: меланогенез, оксидативный стресс, перекисное окисление липидов, защита от солнца, фотостарение, витилиго, супероксиддисмутаза, экстракт дрожжей

Меланогенез – это процесс образования меланина из тирозина с помощью ферментов тирозиназы и ДОФА-оксидазы. Меланосомы, гранулы, заполненные меланином, транспортируются в кератиноциты через ветвящиеся отростки путем фагоцитоза. Меланоциты располагаются среди клеток базального слоя и имеют несколько отростков, которые могут удаляться на расстояние до 100 мкм от тела клетки до мембран отдельных кератиноцитов. Распределение меланоцитов и способ их ветвления в норме таковы, что почти каждая клетка базального слоя контактирует с их концевыми отделами. Имеет место и контакт отростков меланоцитов между собой. Образование меланосом и синтез в них меланинового пигмента – процессы независимые, поскольку у альбиносов, а также у больных витилиго в эпидермисе присутствуют меланоциты с меланосомами, не содержащие премеланин и меланин. Биосинтез меланина начинается на внутренних мембранах меланосом. Под действием тирозиназы (тирозингидролазы) тирозин превращается в L-ДОФА-хинон (L-диоксифенилаланин). Кроме того, тирозиназа очень чувствительна к ультрафиолету и ионам меди и кислорода. В дальнейшем последовательно протекают такие этапы:

1. ДОФА-хинон преобразуется в содержащий индольное кольцо ДОФА-хром.

2. Ферменты ДОФА-хром-таутомераза и DHICA-оксидаза превращают ДОФА-хром в 5,6-дигидроксииндол-2-карбоновую кислоту (5,6-dihidroxyindole-2-carboxylic acid – DHICA).

3. Заключительный этап синтеза – полимеризация 5,6-дигидроксииндол-2-карбоновой кислоты (DHICA) с образованием коричневого DHICA-меланина, содержащего от 100 до 1000 мономеров DHICA. Для этой реакции необходимо присутствие цинка и кислорода.

4. ДОФА-хром может также превращаться в 5,6-дигидроксииндол (5,6-dihidroxyindole, DHI). Продуктом окислительной полимеризации DHI является черный или коричневый DHI-меланин (эумеланин), содержащийся в коже и волосах. Он нерастворим в органических растворителях и устойчив к химической обработке. Таким образом, физиологический меланогенез невозможен без тирозина, молекулярного кислорода, ионов меди и цинка [1].

Регуляция меланогенеза

Медиаторы нервной системы – катехоламины влияют на гипоталамус, который в свою очередь стимулирует промежуточную долю гипофиза к выработке меланостимулирующего гормона (МСГ). Установлено, что МСГ могут продуцировать сами кератиноциты под воздействием ультрафиолета и других факторов (воспаление, травмы). На меланогенез оказывают влияние гормоны надпочечников, щитовидной и половых желез, а также стресс, химические и физические факторы (нервные окончания вырабатывают нейропептиды, стимулирующие меланогенез).

Функции меланина

Классическая структура меланина – длинноцепочечный полимер. Это определяет его барьерную защитную функцию. В литературе упоминается о том, что меланины, синтезируемые в организме человека, участвуют в ликвидации любого стрессового воздействия и являются составной частью иммунной системы организма. Меланин дезактивирует свободные радикалы, возникающие после облучения организма ультрафиолетом и ионизирующим излучением, а также в результате ряда ферментативных процессов и реакций аутоокисления; катализирует многие биохимические процессы; обладает ионообменными свойствами.

Основная функция меланина заключается в том, чтобы регулировать количество ультрафиолетового (УФ) излучения, проникающего в кожу. Спектр поглощения меланина перекрывает весь диапазон видимого света и УФ-диапазона. При поглощении квантов света часть энергии меланин превращает в тепло, а часть расходует на фотохимические реакции. Меланин и его предшественники могут окисляться, полимеризоваться, а также продуцировать свободные радикалы кислорода, которые повреждают клетку. Из-за способности меланина генерировать активные формы кислорода его называют обоюдоострым мечом кожи [2].

Дефицит меланина и оксидантный стресс

В данном обзоре мы решили сделать акцент на пациентах с гипохромиями, в частности с витилиго. Больные витилиго составляют 0,5–4% всего населения земного шара. Это около 40 млн человек [3]. Существуют различные классификации витилиго. В большинстве из них в качестве критериев используются распространенность и локализация очагов депигментации. Согласно классификации J.P. Ortonne витилиго подразделяется на локализованное, генерализованное и универсальное.

фокальная (одно или несколько пятен на отдельном участке кожного покрова, не составляющем сегмента);
сегментарная (одно пятно или более в пределах сегмента);
витилиго слизистых оболочек.

акрофациальная (с поражением дистальных отделов конечностей и лица);
вульгарная (с появлением симметричных множественных депигментированных пятен на различных участках кожи);
смешанная.

Универсальная форма имеет место, когда пигмент отсутствует на площади, превышающей 80% общей площади кожного покрова.

В настоящее время нет четких критериев активности витилиго. Согласно оценке по шкале VIDA (Vitiligo disease activity ), предложенной D. Njoo и соавт. (1999) [4], за прогрессирование витилиго принимается увеличение существующих очагов депигментации или возникновение новых в течение последнего года. Отсутствие роста и появления пятен в течение более 1 года – характерные признаки стабильного течения витилиго.

В патогенезе заболевания особое значение имеют генетические факторы. Установлен аутосомно-рецессивный тип наследования, обусловленный отсутствием в меланоцитах и меланосомах фермента тирозиназы.

Существует множество теорий этиологии витилиго. В исследованиях показано, что общим для всех групп пациентов с витилиго является повышение активности перекисного окисления липидов, что приводит к накоплению гидроперекисей липидов, диеновых конъюгатов и малонового диальдегида в крови. Выявлены изменения и среди ферментов антиокислительной системы, контролирующих уровень активных форм кислорода. У пациентов с витилиго установлено также снижение активности супероксиддисмутазы (СОД) и каталазы [5]. Ряд авторов подтверждают снижение активности этих экзогенных ферментов при различных патологических процессах [6, 7].

Коррекция активности супероксиддисмутазы

Применение препаратов на основе СОД апробировано многими авторами. В лечении пигментной ксеродермы такие препараты оказывали восстанавливающее действие на структуру кератиноцитов [8], in vitro стимулировали метаболизм фибробластов и действовали на свободные радикалы, оказывая нейтрализующее действие на супероксид-ион. In vivo препараты способствуют детоксикации и стимулируют общий метаболизм в клетках [9]. DISMUTIN BT защищает от свободных радикалов, обладает противовоспалительным действием и замедляет перекисное окисление липидов, устраняет из цепи супероксидные радикалы, не повреждается в ходе реакции и в комплексной терапии показал хорошие результаты в лечении пациентов с витилиго [8].

В 2009 г. было объявлено о выделении новой модификации СОД, получившей название DISMUTIN-J PF, признанной одним из самых быстродействующих и наиболее стабильных природных ферментов. DISMUTIN-J PF был разработан для снижения числа кислородных радикалов в коже при УФ-излучении и других стрессовых воздействиях. Высокая эффективность фермента была продемонстрирована в исследованиях in vitro и ex vivo. Препарат DISMUTIN-J PF представляет собой водный раствор высокоочищенного фермента, полученного биотехнологическим путем из природного штамма дрожжей Saccharomyces cerevisiae [10].

Материалы и методы исследования

УФ-излучение и частый контакт с химическими загрязнителями, такими как озон, приводят к избыточному образованию свободных кислородных радикалов в коже. Они разрушают мембраны путем окисления ненасыщенных жирных кислот и белков, а также вызывают деполяризацию и образование перекрестных связей биополимеров. Это провоцирует возникновение острых состояний, таких как эритема, гиперпролиферация, шелушение и хроническое раздражение кожи с общим повреждением коллагена, что вместе с депонированием эластина в дерме приводит к преждевременному старению кожи.

Собственная защитная система кожи основана на действии СОД. Эндогенные СОД в большом количестве обнаружены в роговом слое. Присутствуют они и в дерме. При фотостарении кожи значительно снижается содержание эндогенного фермента в роговом слое и эпидермисе (D. Sanders и соавт., 2002) (рис. 1) [10].

В данных ситуациях считается обязательной заместительная терапия экзогенным СОД с помощью косметических препаратов. При нанесении на кожу супероксиддисмутаза способна проникать в неповрежденный роговой слой и достигать верхних слоев эпидермиса, что было показано с помощью флуоресцентных меток FITC (I. Emerit и соавт., 1997). Данные литературы, как и информация разработчиков, подтверждают защитный эффект DISMUTIN-J PF при местном применении против УФ-индуцированного повреждения кожных покровов, что проявляется в способности компенсировать отсутствие эндогенной СОД и восстанавливать антиоксидантный гомеостаз кожи. Антиокислительный эффект DISMUTIN-J PF изучали при воздействии свободного кислорода на раствор гиалуроновой кислоты. Защитный эффект DISMUTIN-J PF против перекисного окисления липидов был испытан при УФ-облучении кожи предплечья добровольцев [10].

Результаты и обсуждение

Защита гиалуроновой кислоты от свободных кислородных радикалов

Защитный эффект DISMUTIN-J PF изучали при экспозиции гиалуроновой кислоты в системе, генерировавшей свободный кислород (гипоксантин/ксантиноксидазы). Последствия атаки свободных радикалов определяли путем измерения снижения вязкости раствора гиалуроновой кислоты. DISMUTIN-J PF показал дозозависимую способность защищать данный биополимер от деполимеризации. Концентрация 100 ЕД/мл на протяжении 50 часов сохраняла вязкость раствора гиалуроновой кислоты на уровне, близком к уровню контрольной группы (без обработки активным кислородом) (рис. 2) [10].

Защита кожи от УФ-индуцированной липопероксидации

Защитный эффект препарата DISMUTIN-J PF против перекисного окисления липидов в коже был испытан при ультрафиолетовом облучении (УФО) кожи предплечья добровольцев. Образование липидного пероксида измерялось с помощью хемилюминесценции. В отличие от группы плацебо и группы без нанесения препарата в группе, где применяли DISMUTIN-J PF, наблюдалось существенное ингибирование дополнительного перекисного окисления на фоне УФ-излучения. В группах без нанесения препарата и с нанесением нейтрального геля имел место высокий уровень хемилюминесценции. Группа с защитой экзогенным СОД показала после УФО такой же низкий уровень люминесценции, как и группа добровольцев, не получавших местного средства и УФО (рис. 3) [10].

DISMUTIN-J PF защищает кожу от вредного воздействия свободных радикалов кислорода, образующихся под воздействием УФ-излучения или других факторов окружающей среды, таких как озон. Экзогенный фермент помогает отсрочить преждевременное старение кожи, вызванное воздействием солнечного излучения. Проявлениями такого фотостарения становятся сухость, образование морщин и пигментных пятен, потеря эластичности. DISMUTIN-J PF также облегчает симптомы раздражения кожи, то есть обладает как защитной, так и профилактической активностью. В связи с этим DISMUTIN-J PF должен быть рассмотрен для включения в новые формулы продуктов защиты от солнца, неблагоприятного воздействия факторов внешней среды, в состав продуктов для восстановления кожи после пребывания на солнце и в состав средств, стабилизирующих окислительные процессы в коже [10].

Лечение витилиго на основе коррекции перекисного окисления липидов

Ускорения окисления L-ДОФА для усиления синтеза меланина достигают путем воздействия фотосенсибилизаторов совместно с УФ-А-облучением (ПУВА-терапия) или специфических альфа-липопротеинов плацентарного экстракта, а также за счет восполнения недостатка в коже микроэлементов – ионов меди и кальция; требуется уменьшение содержания в коже пероксид-ионов – нанесение на поврежденные участки дополнительного количества каталазы и антиоксидантов; стимуляция пролиферации и миграции меланоцитов – нанесение экстракта плаценты, содержащего гликосфинголипиды и эндотелин, экстракта плодов черного перца, содержащего пиперин, гиалуронатов. Особенность витилиго заключается в том, что течение заболевания зависит от психоэмоционального состояния больных. Поэтому среднестатистическая эффективность медикаментозного лечения витилиго составляет 30–40% [11]. Описано применение витаминов (РР, В6, В12), фурокумариновых соединений, седативных и пероральных антиоксидантных препаратов [3] в комплексе с УФО. Часто рекомендуются маскирующие декоративные средства.

Сочетание указанных принципов местной терапии было апробировано на основе гидрополимерного геля Витискин (Vitiskin, ISIS, Швейцария) в университетской клинике г. Безансон, Франция, в 2007 г. [8]. В состав геля для наружного применения входят СОД, цинк, медь, пантотенат кальция и витамин В12. Применение экзогенной дисмутазы защищает кожу больных витилиго от свободных радикалов, подавляет избыточное перекисное окисление липидов и оказывает противовоспалительное действие. Микроэлементы цинк и медь защищают кожу от окислительных повреждений. Кроме того, медь является важным кофактором тирозиназы и способствует синтезу нового меланина. Пантотенат кальция необходим для усвоения меди и совместно с витамином В12 участвует в синтезе меланина. Назначенное лечение в комбинации с УФО-терапией в 83% случаев привело к умеренному улучшению течения витилиго – прогрессированию равномерной репигментации. У 17% пациентов исследование было завершено со значительным улучшением (курс лечения 10 недель в сочетании с УФО-терапией) [7].

Сейчас выдвигаются новые требования к составу косметических средств. В частности, в связи с онкологической настороженностью рекомендуется не включать в них такие компоненты, как парабены [12, 13]. С учетом этой тенденции удалось стабилизировать фермент супероксиддисмутазу без использования парабенов. Новая молекула была классифицирована как DISMUTIN-J PF и рекомендована для включения в состав лечебных косметических средств как экстракт дрожжей (yeast extract) [10].

Несмотря на сохранение клинического интереса к нарушениям обмена меланина и достаточно глубокую изученность этих процессов на биохимическом и молекулярном уровнях, эффективных способов коррекции гипохромии, в частности витилиго, не существует. Теория оксидантного стресса и изучение процессов перекисного окисления липидов заставляют внимательно относиться к местным методам терапии, стабилизирующим окислительные процессы в коже. Высокая клиническая эффективность фермента супероксиддисмутазы, выделенного из экстракта дрожжей Saccharomyces cerevisiae , позволяет рекомендовать его вместе с микроэлементами медью и цинком, витамином В12 и пантотенатом кальция в составе препаратов для лечения пациентов с витилиго.

DISMUTIN BT защищает от свободных радикалов, обладает противовоспалительным действием и замедляет перекисное окисление липидов, устраняет из цепи супероксидные радикалы, не повреждается в ходе реакции и в комплексной терапии показал хорошие результаты в лечении пациентов с витилиго.

Применение экзогенной дисмутазы защищает кожу больных витилиго от свободных радикалов, подавляет избыточное перекисное окисление липидов и оказывает противовоспалительное действие.

Читайте также: